产品简介

 

Gravity Desalting Column,8.3 mL（重力脱盐柱，8.3 mL）适用于分子量大于5 kDa的蛋白或其他大分子样品的脱盐、缓冲液置换或小分子的去除。

Gravity Desalting Column,8.3 mL（重力脱盐柱，8.3 mL）装有8.3 mL Dextran G-25 M。Dextran G-25 M系列介质是一类以葡聚糖为基质的凝胶过滤层析介质，其工作原理主要是利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。

 

产品信息

 

货号	20741ES03/20741ES08
规格	1个/盒 / 5x1个/盒

 

产品性质

 

基质	Dextran G-25 M
粒径	85-260 µm
柱体积	8.3 mL
最大上样量	2.5 mL
脱盐效率	>90%
排阻极限	5 kDa
保存溶液	20%乙醇

 

储存条件

 

2~8℃保存，有效期2年。

 

使用说明

 

1. 需准备试剂

平衡液可选用样品期望置换的缓冲液，所用水和平衡液在使用前用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤。

2. 样品准备

样品在上样前建议离心或用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤，减少杂质影响。

3. 样品脱盐

1）准备：将Gravity Desalting Column,8.3 mL（重力脱盐柱，8.3 mL）垂直置于重力柱支架上，或用铁架台固定，先后打开上盖、下盖，依靠重力流干保护液。

2）平衡：加入4 mL平衡液对预装介质进行平衡，重复5次，最终使用平衡液体积约3倍介质体积。

3）上样：加入样品，样品上样体积范围1.0-2.5 mL, 最大不超过2.5 mL, 上样体积不足时用平衡液稀释样品至1.0 mL。

4) 洗脱：待样品加入填料后，继续加入平衡液进行洗脱，分离收集洗脱液，从加入样品开始，先收集前端2.0 mL, 然后再按照固定体积（建议0.5-1 mL/管）收集样品，检测每管蛋白浓度和盐浓度，计算回收率和脱盐效率。平衡液至少添加至蛋白洗脱完全再停止。

5）再平衡：加入4 mL平衡液对介质进行再平衡，重复至少5次，将残留的盐冲洗干净，方可进行下一次脱盐。同一个柱子不建议用于不同样品的脱盐。

4. 清洗与再生

如果柱子的流速或者脱盐效果变差，为除去残留的杂质，如变性蛋白或脂质等，有时需要对脱盐柱进行在位清洗。常用的清洗液为 0.1-0.2 M NaOH或非离子型去垢剂。

1）使用一倍柱体积 0.1-0.2 M NaOH，依靠重力清洗介质。

2）用足够量的去离子水，冲洗介质，直至 pH 值至中性。

3）用至少三倍柱体积20%乙醇溶液冲洗介质，然后分别盖上下堵头和上塞，在介质上端保留至少1cm高的 20%乙醇保护液，置于2-8℃保存。

【注】不建议介质多次重复再生和使用。

 

注意事项

 

1. 请勿冷冻保存本产品

2. 本产品仅作科研用途。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231222