LysoSensor^{®系列探针是主要对活细胞中的酸性区室（如溶酶体、顶体精子）动态合成和功能进行研究的一类荧光探针，该类探针的染色具有向酸性，可通过质子化作用在酸性细胞器内累积。该类探针的这种质子化作用还可解除染料的荧光淬灭性，使其所发射的荧光强度更强。因此，与LysoTracker系列探针相比，LysoSensor®系列探针随着细胞器的酸化程度其荧光强度呈pH依赖型(向酸)增强。}

本品LysoSensor™ Green DND-189具有较低的pKa值，仅在酸性区室内才具有荧光。本品以溶于无水DMSO的1 mM储存液形式提供。

如对活细胞中的酸性区室进行选择性标记和染色，可选择LysoTracker®系列探针。

冰袋运输。-20℃避光干燥保存，避免反复冻融，有效期6个月。

Q:保质期多久？

A:-20℃避光保存，半年有效。

Q:四种溶酶体探针的区别？

A:LysoTracker®--不依赖 pH 的活细胞溶酶体荧光探针（40738 和 40739）； LysoSensor™--依赖 pH 的活细胞溶酶体荧光探针（40767 和 40768）。

Q:染色时细胞的状态？

A:这四种探针是对活细胞中的酸性区室进行染色。所以必须要在活细胞状态下染色。

Q:染色完成后，细胞是否能固定后再检测荧光信号？

A:固定后会破坏溶酶体的酸性环境从而会造成荧光减弱甚至消失的情况，染色前后均不建议固定。

Q:可以和二抗一起孵育吗？

A:不可以，孵育二抗必须要透化处理，而透化会破坏溶酶体的酸性环境，影响染色效果。

Q:这个探针可以染自噬溶酶体吗？可以染色其他酸性细胞器吗？

A:自噬溶酶体和正常的溶酶体在形态结构上有较大差异，该探针主要是针对常规的溶酶体染色，对于自噬溶酶体的染色效果不是很确定。可以参考一些使用过该产品发表的文献资料确定可以染色其他酸性细胞器。

Q:植物细胞和组织适用吗？

A:理论上可以，一般植物细胞或者组织要制成原生质体。

Q:染色后可以放置一夜，再荧光检测吗？

A:不可以。建议染色完立即检测荧光，荧光信号会随时间而逐渐减弱。

Q: 这款探针适用的pH范围及pKa值分别是？

A: 该探针适用的pH检测范围是4.5-6.0，pKa为5.2。

Q:用细胞培养基配成工作液以后稳定吗？可以存放多久？

A:工作液是需要现配现用的，不建议保存。

Q:检测仪器？

A:荧光显微镜、共聚焦显微镜、酶标仪、流式细胞仪。

Q:如何做到同时染色溶酶体和细胞核的？

A:建议用 Hoechst 33258/ Hoechst 33342 染色细胞核，这个染料可以直接染活细胞不需要固定操作。

Q:荧光信号较弱？

A:大致有 3 个因：

1.溶酶体探针浓度过低，建议适当增大浓度；

2.染色时间过短，建议延长染色时间；

3.染色完之后，放置过长时间才检测信号；建议染色完立刻检测。

Q:没有荧光信号？

A:大致有 3 个原因：

1.先用多聚甲醛、乙醛等固定细胞，破坏了溶酶体的酸性环境。

2.染色完后，又用多聚甲醛固定细胞，或者透化细胞，破坏了溶酶体的酸性环境；染色前后均不建议固定细胞；

3.染色完到上机检测这一段时间过长，并且没有避光处理。建议避光染色，染色完立即检测荧光信号。

Q:在活细胞状态下，用 50 µM 探针染色 50 min，然后发现除了溶酶体，细胞质中也

有荧光信号，这主要是什么原因导致？

A:1.溶酶体探针浓度过大，建议适当降低浓度；  

2.溶酶体探针染色时间过长，建议适当缩短时间。