产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit（UDG plus）是一款用于检测猴痘病毒的PCR试剂盒。包含猴痘病毒引物探针，采用公司新一代抗体法热启动Taq酶的2×Mix预混液试剂以及阳性对照，已包含Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品含有 UDG 酶，可有效防止气溶胶污染的风险。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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13863ES25 (25 T) |
13863ES60 (100 T) |
13863ES80 (1000T) |
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13863-A |
2×TaqMan qPCR Mix |
313 μL |
1.25 mL |
12.5 mL |
|
13863-B |
Prime&Probe Mix |
25 μL |
100 μL |
1 mL |
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13863-C |
MPV Negative Control |
125 μL |
500 μL |
5 mL |
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13863-D |
MPV Positive Control |
125 μL |
500 μL |
5 mL |
【注】
a. 2×TaqMan qPCR Mix要包含有耐热UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase、UDGase、dNTPs、dUTP, Mg2+ , stabilizers和enhancers等。
b. Prime&Probe Mix主要包含目的基因引物探针和内源性内标引物探针。
c. MPV Negative Control为去酶水。
d. MPV Positive Control为含目的基因和内源性内标的质粒，目的基因为FAM通道，内标为VIC通道。
运输和保存方法
冰袋运输。-20°C储存，有效期12个月。
反应体系
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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2×TaqMan qPCR mix |
12.5 |
1× |
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Primer&Probe mix |
1 |
- |
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模板 |
5 |
- |
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ddH2O |
up to 25 |
- |
适用机型
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
参考扩增程序
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循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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预消化 |
37℃ |
5 min |
1 |
|
预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
变性 |
95℃ |
15sec |
45 |
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退火/延伸 |
60℃ |
30 sec |
【注】：退火/延伸温度可根据实验要求适当调整。
结果判读
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FAM |
VIC |
结果判定 |
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1 |
Ct＞38或UNDET |
Ct≤35 |
阴性 |
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2 |
Ct≤35 |
Ct≤35 |
阳性 |
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3 |
35<Ct≤38 |
Ct≤35 |
需重新测试，Ct值仍在此区间且曲线呈标准“S”型，则判断为阳性，否则判断为阴性 |
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴实验手套进行操作。
HB220805
