本品采用了逆转录病毒载体,载体装载了MERS(中东呼吸综合征冠状病毒)病毒ORF1 a/b 基因部分序列,ORF4 b 基因部分序列和N基因编码区的全部序列。本品在293T细胞内进行假病毒的制备,假病毒为逆转病毒外膜包裹。本品用于MERS病毒核酸检测试剂能力验证以及提取试剂盒的性能验证,也可用于开展MERS病毒核酸检测实验室进行检测能力验证和实验室内质量控制等。
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
11904ES70 |
11904ES74 |
||
11904 |
MERS-pseudovirus |
1×1 mL |
5×1 mL |
【注】
1)靶值(对数值)≥1×108 copies/mL,具体滴度请参考具体批次COA
2)本品非MERS病毒全序列,使用前请确认所选引物探针在本品覆盖范围。序列见附录。
3)冻融会导致假病毒的稳定性降低,从而影响核酸抽提的效果及PCR检测结果,使用时应避免反复冻融。
4)病毒灭活处理可能会导致 RNA 的降解,请根据实际实验需求合理选择。
5)如果需要对本产品进行稀释处理,可以使用磷酸盐缓冲液(PBS)或者生理盐水(0.9% NaCl)进行稀释。
6)本产品区别于噬菌体假病毒,最大程度模拟了病毒结构,本品需要提取RNA后使用。
使用方法
1.假病毒融化:将假病毒从-80° C冰箱中取出,进行冰浴融化或置于4℃条件下自然融化,然后开始相关的实验操作。
2.假病毒灭活(可选项):在生物安全柜中吸取当次实验所需量的假病毒于EP管中,置于56℃条件下灭活30 min。
3.假病毒核酸提取及QPCR检测:按照核酸提取试剂盒及QPCR测试剂盒的说明书要求进行相关的实验操作。
运输与保存方式
干冰运输。-80℃保存,有效期6个月。本品应避免反复冻融,建议分装保存。
注意事项
1.实验过程中请使用RNase free耗材。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3.如果使用时本品不慎溅到眼睛、皮肤或其他身体部位请立即使用大量清水冲洗。
4.使用本品所产生的实验废弃物需要通过高压灭菌处理后按照医疗废弃物处理要求进行处理。
5.本产品仅作科研用途!
附录
1.ORF1 a/b序列
TTCAGTGTGTCTCTATTGCCGTGCGCATATAGAACATCCTGATGTCTCTGGTGTTTGTAAATATAAGGGTAAGTTTGTCCAAATCCCTGCTCAGTGTG
TCCGTGACCCTGTGGGATTTTGTTTGTCAAATACCCCCTGTAATGTCTGTCAATATTGGATTGGATATGGGTGCAATTGTGACTCGCTTAGGCAAGCA
GCACTGCCCCAATCTAAAGATTCCAATTTTTTAAACGAGTCCGGGGTTCTATTGTAAATGCCCGAATAGAACCCTGTTCAAGTGGTTTGTCCACTGA
TGTCGTCTTTAGGGCATTTGACATCTGCAACTATAAGGCTAAGGTTGCTGGTATTGGAAAATACTACAAGACTAATACTTGTAGGTTTGTAGAATTAG
ATGACCAAGGGCATCATTTAGACTCCTATTTTGTCGTTAAGAGGCATACTATGGAGAATTATGAACTAGAGAAGCACTGTTACGACTTGTTACGTGAC
TGTGATGCTGTAGCTCCCCAT
2.N基因
GTATCTTAATTGATTTTAACGAATCTCAATTTCATTGTTATGGCATCCCCTGCTGCACCTCGTGCTGTTTCCTTTGCCGATAACAATGATATAACAAATAC
AAACCTATCTCGAGGTAGAGGACGTAATCCAAAACCACGAGCTGCACCAAATAACACTGTCTCTTGGTACACTGGGCTTACCCAACACGGGAAAGTC
CCTCTTACCTTTCCACCTGGGCAGGGTGTACCTCTTAATGCCAATTCTACCCCTGCGCAAAATGCTGGGTATTGGCGGAGACAGGACAGAAAAATTAA
TACCGGGAATGGAATTAAGCAACTGGCTCCCAGGTGGTACTTCTACTACACTGGAACTGGACCCGAAGCAGCACTCCCATTCCGGGCTGTTAAGGATG
GCATCGTTTGGGTCCATGAAGATGGCGCCACTGATGCTCCTTCAACTTTTGGGACGCGGAACCCTAACAATGATTCAGCTATTGTTACACAATTCGCGC
CCGGTACTAAGCTTCCTAAAAACTTCCACATTGAGGGGACTGGAGGCAATAGTCAATCATCTTCAAGAGCCTCTAGCTTAAGCAGAAACTCTTCCAGA
TCTAGTTCACAAGGTTCAAGATCAGGAAACTCTACCCGCGGCACTTCTCCAGGTCCATCTGGAATCGGAGCAGTAGGAGGTGATCTACTTTACCTTGAT
CTTCTGAACAGACTACAAGCCCTTGAGTCTGGCAAAGTAAAGCAATCGCAGCCAAAAGTAATCACTAAGAAAGATGCTGCTGCTGCTAAAAATAAGAT
GCGCCACAAGCGCACTTCCACCAAAAGTTTCAACATGGTGCAAGCTTTTGGTCTTCGCGGACCAGGAGACCTCCAGGGAAACTTTGGTGATCTTCAAT
TGAATAAACTCGGCACTGAGGACCCACGTTGGCCCCAAATTGCTGAGCTTGCTCCTACAGCCAGTGCTTTTATGGGTATGTCGCAATTTAAACTTACCCA
TCAGAACAATGATGATCATGGCAACCCTGTGTACTTCCTTCGGTACAGTGGAGCCATTAAACTTGACCCAAAGAATCCCAACTACAATAAGTGGTTGGA
GCTTCTTGAGCAAAATATTGATGCCTACAAAACCTTCCCTAAGAAGGAAAAGAAACAAAAGGCACCAAAAGAAGAATCAACAGACCAAATGTCTGAA
CCTCCAAAGGAGCAGCGTGTGCAAGGTAGCATCACTCAGCGCACTCGCACCCGTCCAAGTGTTCAGCCTGGTCCAATGATTGATGTTAACACTGATTAG
TGTCAC
3.ORF4 b序列
ACTCTAGCTTTGCTAAATCTCACTGATGAAGATTTAGCTAGAGATTTTTCACCCATTGCGCTCTTTTTGCGCAATGTCAGATTTGAGCTACATGAGTTCGC
CTTGCTGCGCAAAACTCTTGTTCTTAATGCATCAGAGATCTACTGTGCTAACATACATAGATTTAAGCCTGTGTATAGAGTTAACACGGCAATCCCTACTA
TTAAGGATTGGCTTCTCGTTCAG
HB20200410