YXK26/100层析空柱是为广大用户精心设计的实验室型低压层析空柱,适合琼脂糖、葡聚糖基架以及以聚合物为基架的低压层析介质,能方便的连接到 AKTA 等层析系统上,该产品由高精度玻璃管和 POM 塑料制成,具有良好的生物相容性和化学耐受性,适合绝大部分水性溶液。此规格的空柱常用于凝胶层析介质的装填。
YXK 柱主要由三部分组成:柱头适配器、玻璃柱管、下柱头。
柱管:柱管为双层设计,内管由高精度玻璃制成,外管为聚丙烯酸塑料制成,用于保护内管,同时形成的夹套层可以通水浴保温。
柱头适配器(上柱头):由软管、柱头螺杆、O 型圈、筛网、分布器等组成。
下柱头:由软管、O 型圈、下筛网、分布器等组成。
YXK26/100层析空柱具有以下优点:
1) 使用方便、操作容易;
2) 倒翻口接口设计以及高弹性密封圈有效防止渗漏;
3) 柱头液流分布均匀,容易装出高柱效的层析柱;
4) 外配有恒温夹套,方便层析过程的温度控制。
产品性质
内径 |
26 mm |
高度 |
100 cm |
体积 |
435-514 mL |
柱高 |
82-97 cm |
操作压力 |
5 bar(最大) |
操作温度 |
4-60℃ |
PH稳定性 |
1~14 |
化学稳定性 |
常见水相溶液 |
网孔尺寸 |
10 µm |
运输和保存方法
室温运输和保存即可。
注意事项
1. 层析柱外壳使用的是聚丙烯酸材质,不可以使层析柱外壳接触浓度大于40%的有机溶剂,如乙醇、乙腈、丙酮等,也不可以使用高浓度的有机溶剂如100%乙醇擦拭外壳,否则会导致其龟裂。
2. 装柱前确认柱塞头与螺旋杆是否拧紧,若没拧紧会导致漏液。
3. 装填好的层析柱堵塞严重的时候可以使用反向清洗的方法,但是反向冲洗需要降低流速至正常流速的一半以下。
4. 使用层析柱时将保护软管置于柱头内,防止连接软管被折影响流速。
5. 柱头螺旋杆处顶丝需保证随时拧紧、到位,若松动会磕坏丝杆,导致无法拧紧密封圈。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7. 本产品仅作科研用途!
使用方法
1 下柱头组装:
1)先将底部螺旋杆旋进调整旋钮;
2)再将底部螺旋杆穿过底部固定器;
3)将O型圈装入柱塞头末端;
4)将带有O型圈的柱塞头与螺旋杆连接,旋紧;
5)将筛板平整放在柱塞头上;
6)将分布器扣在柱塞头上;
7)最后将底部固定器旋进柱管底端。
2 上柱头组装:
1)将O型圈装入柱塞头末端;
2)上柱头的柱塞头、上筛板、分布器的安装参考下柱头的组装方法;
3)将组装好的上柱头,接入柱管,旋紧柱头固定器,即完成柱头组装。
3 层析柱装填
1)组装层析柱(如有需要连接装柱器)。
2)取下下柱头用装柱缓冲液冲洗柱底适配器,排除筛网下面的气泡,将下柱头安装在层析柱底部,旋紧调整旋钮,并在层析柱底部保留1 cm 左右高度的液体。
3)用装柱缓冲液重悬介质,制成 50%~75%左右的介质悬浮液。
4)一次性将介质倒入柱管中,避免产生气泡。
5)如连接有装柱器,立即往装柱器中缓慢加入装柱缓冲液。将适配器或装柱器上盖与层析系统相连接。
6)设定所需流速+ ,打开柱下端,启动泵,进行压柱。
7)柱床稳定后保持 30 min 以上,关闭泵和底阀。
8)如连接有装柱器,移除装柱器后连接适配器。
9)调节适配器,使其固定在胶面上 0.5~1 cm 处,并保证适配器入口充满液体。
10)打开底阀,连接泵,继续用设定的流速(注意压力不要超过 0.3 Mpa)继续压柱待胶面高度保持不变,标记此时胶面高度。
11)暂停机器,关闭底阀,断开柱头入口,调低适配器至胶面下 3~5 mm处。封闭上柱口,装柱完成。
4 柱效检测
1)柱效测定可以采用丙酮作为指示剂或者NaCl作为指示剂,按照下表配制指示剂溶液和流动相。
丙酮法测柱效 |
NaCl法测柱效 |
|
样品 |
1.0%(v/v)丙酮水溶液 |
0.8 M NaCl(溶于水) |
样品体积 |
1.0%柱体积 |
1.0%柱体积 |
流动相 |
水 |
0.4 M NaCl水溶液 |
流速 |
20 cm/h |
20 cm/h |
检测器 |
UV 280 nm |
电导率 |
2)计算柱效: 根据UV或者电导率曲线计算理论塔板高度(HETP)、理论塔板数(N)和非对称因子(As), 公式如下:
HETP=L/N ;N=5.54(VR/Wh)2
其中:VR=保留体积;Wh=半高峰宽;L=柱高;N=理论塔板数;VR和Wh的单位应一致; As=b/a
其中:a=在10%峰高处的第一个半峰宽; b=在10%峰高处的第二个半峰宽
3)结果评价
由以上公式计算出的HETP的数值若小于三倍介质平均颗粒大小且非对称因子在0.7~1.3则判定为合格(对于Geldex介质每米的塔板数应该大于10000)。对于不理想的柱效需要分析原因并重新装柱。
HB220526