LysoSensor™ Green DND-189 溶酶体绿色荧光探针

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COA

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产品描述

       LysoSensor®系列探针是主要对活细胞中的酸性区室(如溶酶体、顶体精子)动态合成和功能进行研究的一类荧光探针,该类探针的染色具有向酸性,可通过质子化作用在酸性细胞器内累积。该类探针的这种质子化作用还可解除染料的荧光淬灭性,使其所发射的荧光强度更强。因此,与LysoTracker系列探针相比,LysoSensor®系列探针随着细胞器的酸化程度其荧光强度呈pH依赖型(向酸)增强。

本品LysoSensor™ Green DND-189具有较低的pKa值,仅在酸性区室内才具有荧光。本品以溶于无水DMSO的1 mM储存液形式提供。

如对活细胞中的酸性区室进行选择性标记和染色,可选择LysoTracker®系列探针。


产品性质

分子式(Molecular Formula)

C24H22N4O2

分子量(Molecular Weight)

398.46

Ex/Em

443⁄505

pKa

~5.2

颜色(Color)

绿色

结构式(Structure)

5.jpg


运输和保存方法

冰袋运输。-20℃避光干燥保存,避免反复冻融,有效期6个月。


注意事项

1)不能储存在无霜冰箱,建议按照单次用量分装于-20℃冻存。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本产品仅作科研用途!


使用方法

使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。

1. 工作液的配制

利用培养基或合适的缓冲液将1 mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度至少为1 µM;

注1:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。2)若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。

注2:工作液现配现用。

2. 染色

2.1 对于贴壁细胞

1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。

2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30 min~2 h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。

3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。

2.2 对于悬浮细胞

1)离心,吸除上清。

2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30 min~2 h(具体时间需根据细胞类型而定)。

3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。

4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。

注:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。

 

HB210528

400-6111-883