Cell|北京大学孔道春:发现RNA-DNA杂交链中间体

DNA同源重组是生命体的基本生物事件，是遗传物质DNA代谢（DNA复制，重组，修复）的三种主要途径之一。所以，阐明DNA同源重组的分子机制显得尤为重要。目前，已知的DNA同源重组的步骤（如图1）：

1）链末端切除：核酸酶DNA2对DNA双链断裂处进行5’-链降解，切除大约几千个核苷酸，导致3’-单链DNA形成；

2）3’-单链DNA入侵同源DNA模板链：通过多个蛋白帮助，Rad51包裹 3'-单链DNA形成核酸-蛋白复合体，该复合体侵入同源DNA链, 3'-单链DNA作为引物进行DNA合成；

3）解开Holliday Junction(HJ)结构：3’-单链DNA侵入同源DNA模板链后，进行DNA合成及链交换反应，并最终完成DNA同源重组过程。

图1. 同源重组具体过程

图源：Sung P, Klein H (2006). "Mechanism of homologous recombination: mediators and helicases take on regulatory functions". Nature Reviews Molecular Cell Biology 7: 739-750.

在DNA同源重组领域，有一个关键问题尚未阐明—细胞是如何进行末端切除5’-链的核苷酸，但又保证3’-链的绝对完整呢？过去二三十年，大家普遍接受的观点是：3’-单链是通过RPA（replication protein A）的结合来保护的。但是，此观点缺乏确切的实验依据。

2021年3月4日，北京大学生命科学学院孔道春课题组在Cell（IF 38）上发表了一篇题为RNA polymerase III is required for the repair of DNA double-strand breaks by homologous recombination的研究论文。此研究发现3’-单链DNA是通过形成暂时的RNA-DNA杂交链来得到保护，催化此RNA链合成的是RNA聚合酶III。RNA-DNA杂交链中间体的发现将推进解决真核细胞DNA同源重组领域里疑难问题的解决，并有助于科研人员对DNA同源重组分子机制更深层次的理解，同时，也将促进疾病的基因治疗、抗癌药物的研发等。

（点此查看原文，以上新闻来源于北京大学新闻网）

在这项研究中，该团队选择使用了翌圣的qPCR mix用于相关基因的RT-qPCR分析。以下截图来源于文章：

除了上述产品外，翌圣还有多款qPCR产品供您选择。

翌圣qPCR产品选择指南

在此，给大家强烈推荐一款适用于所有qPCR机型、灵敏度高的Hieff UNICON^®Universal Blue qPCR 预混液（Cat NO. 11184ES），该产品还具有检出率高、特异性好、分辨率高等特点。

1、适用于所有qPCR机型，再也不用根据仪器调整ROX浓度

图2. Hieff UNICON^® Universal Blue 预混液可实现全平台通用。针对不同仪器平台，与T品牌对比，Hieff UNICON^® Universal Blue 预混液Ct值起峰更加靠前。以2µl的质粒10倍梯度稀释液为模板，扩增IL23R基因。

2、灵敏度高，可检测低至单拷贝的质粒DNA

图3.Hieff UNICON^® Universal Blue 预混液可有效检测7个数量级范围的模板量，扩增效率高，可在宽广的线性范围内获得良好的线性关系。以2µl的10⁶-10⁰拷贝/µl的质粒为模板，扩增人IL23R基因。

翌圣qPCR mix发表的其它文献（部分高分）

1. Lu, XY., Shi, XJ., Hu, A. et al. Feeding induces cholesterol biosynthesis via the mTORC1–USP20–HMGCR axis. Nature (2020). （IF 43）

2. Wentao Dong et al. An SHR-SCR module specifies legume cortical cell fate to enable nodulation. Nature (2020)（IF 43）

3. Han X., et al., Mapping the Mouse Cell Atlas by Microwell-Seq[J]. Cell. 2018 Feb 22;172(5):1091-1107.e17. （IF 30.410）

4. Wang X, Ni L, Wan S, et al. Febrile temperature critically controls the differentiation and pathogenicity of T helper 17 cells[J]. Immunity, 2020, 52(2): 328-341. e5. （IF 21.522）

5. Xiao J, Li W, Zheng X, et al. Targeting 7-Dehydrocholesterol Reductase Integrates Cholesterol Metabolism and IRF3 Activation to Eliminate Infection[J]. Immunity, 2020, 52(1): 109-122. e6.（IF 21.522）

6. Han F, Liu X, Chen C, et al. Hypercholesterolemia risk-associated GPR146 is an orphan G-protein coupled receptor that regulates blood cholesterol levels in humans and mice[J]. Cell Research, 2020, 30(4): 363-365.（IF 20.5）

现在扫描下方二维码即可申请Hieff UNICON^® Universal Blue qPCR 预混液（Cat NO. 11184ES）试用装，助您早日发出高分paper！

图片.png