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Hieff™ Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma) 血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒
产品货号:41202ES30
产品规格:30 mL
产品价格:¥2155.00
类别:细胞分离与消化

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  • 产品信息


    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    Hieff Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma)

    血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒

    41202ES30

    30 mL

    室温

    2155.00


    产品描述

    Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。

    本试剂盒采用独特的分离技术,可以快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。


    产品组分

    编号

    组分

    产品编号/规格

    41202-A

     Exosome isolation solution( Serum/Plasma)

    41202ES30/30 mL


    运输和保存方法

    室温运输,本试剂盒可于室温稳定保存24个月。


    注意事项

    1、使用前请将外泌体抽提试剂(41202-A)充分混匀。

    2、产品只针对血清/血浆样本,不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,

    请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。

    3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

    4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    操作方法

    样品预处理:

    1、收集新鲜的样品,置于冰上待用;若为冻存的样品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻,待完全融化后置于冰上待用。

    2、取1 mL血清/血液样品转移至离心管中,4℃,3000×g离心10 min,弃沉淀,并将上清转移至新的离心管中。

    3、将转移的上清,4℃,10,000×g离心20 min,弃沉淀,将上清液转移至新的离心管中。

    外泌体分离:

    1、向预处理后的样品中,加入4倍体积的1×PBS充分混匀。

    Serum/Plasma+PBS

    41202-A试剂用量

    200   μL+800 μL

    200   μL

    1.0   mL+4.0 mL

    1.0   mL

    2、在PBS稀释后的样品中,继续加入相应量的41202-A试剂;盖紧离心管盖,涡旋振荡1 min,放置于4℃冰箱静置2 h。

    3、取出装有混合液的离心管,4℃,10,000×g离心60 min,弃上清(尽可能吸净上清液),收集富含外泌体的沉淀。

    4、吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物,待其充分悬浮于PBS后,将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。

    注:加入PBS的量,建议根据初始样本的体积决定,初始样本体积:1×PBS体积=2.5:1。

    5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃,12,000×g离心2 min,弃沉淀,保留上清液,该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。

    注:此时如果依然可以看到明显的沉淀,建议重复步骤4,重新进行洗涤和沉淀。

    6、纯化后的外泌体可于4℃保存3天,-80℃ 长期保存,建议对外泌体进行分装后保存,避免反复冻融。

    外泌体纯化(可选):

    鉴于血清/血浆中杂蛋白较多,如果后续需要进行细胞共培养或者高通量测序,建议进行进一步纯化。可以使用密理博100kD的孔径的超滤管于4℃以14,000×g离心10-30 min,内管中即为纯化后的外泌体颗粒;除此之外,还可以使用抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

    外泌体除菌(可选):

    获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。

    效果展示

    NTA粒径检测:结果显示通过Yeasen外泌体抽提获得的外泌体分散性好,大小均一,峰形单一。

      1.jpg

     

     

     

     

    样品来源:血液

    检测仪器:ZetaView

    上清用量:200μL

    表面标志物分析:通过Western Blot分析外泌体表面蛋白,可以很好的检测到TSG101,CD63和MHCC的存在。

    2.jpg

     

    样品来源:血液

    裂解方式:RIPA裂解液

    样品用量:200 μL

    核酸分析:通过Agilent 4200分析,可以检测到较为明显的外泌体小RNA条带,足以满足下游高通量测序的需求。

    3.jpg

     

     

     

     

     

    样品来源:血液

    检测仪器:Agilent 4200

    抽提方法:Trizol

    样品用量:0.6 mL


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    价格

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    41201ES25/50

    HieffTM Quick exosome isolation kit(for Cell Culture Media)

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    2155.00/3855.00

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    2155.00

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    1盒(10块)

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    Precast Protein Improve Gels, 10%, 10 wells           

    10%高分辨率梯度预制胶,10孔

    1盒(10块)

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    12%高分辨率梯度预制胶,10孔

    1盒(10块)

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    15%高分辨率梯度预制胶,10孔

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