在 DNA - 蛋白质互作研究的 “江湖” 里,有一款超牛的技术 ——Multi-CUT&Tag !它凭借独特的优势,迅速成为科研 er 们探索生命奥秘的得力助手,今天就带大家一探究竟!
技术原理超硬核
传统研究 DNA - 蛋白质互作的方法或多或少存在一些局限,而 Multi-CUT&Tag 技术则另辟蹊径!它巧妙地利用 Tn5 转座酶和特异性抗体。抗体与目标蛋白质结合后,引导 Tn5 转座酶精准定位到 DNA - 蛋白质互作位点,然后 Tn5 转座酶对 DNA 进行切割并添加测序接头,直接高效地捕获互作信息。相比于传统的 ChIP-seq,Multi-CUT&Tag 无需超声破碎,大大减少了样本损耗,还能降低背景信号干扰,让研究结果更加准确可靠!
应用场景超丰富
神经科学领域
2022 年 12 月,Gonçalo Castelo - Branco 课题组在《Nature Biotechnology》上发表研究 ,通过 anti - mouse Tn5 和 anti - rabbit Tn5,针对鼠抗和兔抗在鼠脑中实现特异性的 Multi - CUT&Tag 技术应用。此研究非常详细地剖析大脑中的祖细胞如何特化成少突胶质细胞,为我们在疾病背景下如何刺激少突胶质细胞群的恢复提供线索,帮助我们深入了解大脑神经细胞的分化机制。
免疫学研究
发育生物学
产品优势超给力
多靶标同时检测
Multi-CUT&Tag 最大的亮点之一就是能够同时检测多个蛋白质与 DNA 的互作。一次实验就能获取多种蛋白质的结合信息,不仅节省了大量的样本、时间和实验成本,还能更全面地解析复杂的调控网络,让研究效率直线飙升!
超高灵敏度与特异性
得益于独特的酶切和标记方式,即使是微量样本,Multi-CUT&Tag 也能精准捕获 DNA - 蛋白质互作信号。并且,它对目标位点的识别特异性极高,能够有效区分特异性结合和非特异性结合,确保研究数据真实有效,为科研成果保驾护航。
操作简便易上手
翌圣全球首发的 Multi-CUT&Tag 试剂盒配套完善(货号12592ES),包含了实验所需的各种关键试剂。科研人员只需按照标准化的操作流程,准备好样本和简单的实验设备,就能轻松开展实验。即使是实验新手,也能快速掌握,大大降低了技术门槛。
表1.翌圣Multi-CUT&Tag试剂盒组分原理
组分名称 | 组分原理 | |
BOX-I | ConA Beads | ConA beads为包被了伴刀豆球蛋白A的磁珠,结合细胞膜糖蛋白,从而捕获细胞 |
DNA Extract Beads | 提取DNA的磁珠 | |
DNA Selection Beads | DNA纯化及分选磁珠 | |
BOX-II | 10 x Binding Buffer | 细胞捕获缓冲液 |
10 x Wash Buffer | 细胞洗涤缓冲液 | |
5% Digitonin | 增加细胞膜通透性,在细胞表明打孔,便于后续转座切割 | |
50 x PB Buffer | 抗体结合缓冲液 | |
10 x Dig-300 Buffer | 转座酶结合缓冲液 | |
Anti-mouse Tn5 | 偶联抗鼠二抗的Tn5复合体 | |
Anti-rabbit Tn5 | 偶联抗兔二抗的Tn5复合体 | |
33 Activating Buffer | 含镁离子,激活Tn5转座活性 | |
15 x Terminate Solution | 终止转座酶活性,同时裂解细胞,释放DNA | |
30 x Proteinase K | 消化蛋白质,释放蛋白质结合的DNA | |
DNA Spike-in Mix (5 ng/μL) | 来源于Ecoli.的三段序列,用于后续分析的标准化 | |
2xHiFi Amplification Mix | 文库扩增酶 | |
i5 Universal Primer | 文库接头 | |
i7 Index Primer (T701) | 文库接头,含测序index |
这么宝藏的 DNA - 蛋白质互作研究利器,真的太香了!无论是基础科研,还是应用研究,Multi-CUT&Tag 都能大显身手。还在为 DNA - 蛋白质互作研究发愁的宝子们,赶紧码住,说不定下一个科研突破就靠它啦!
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