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400-6111-883
Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI (红色)
产品货号:40718ES50
产品规格:50μg
产品价格:¥425.00
类别:荧光探针/细胞染色

说明书下载

  • HB171031


    产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    CM-DiI 活细胞染色剂

    40718ES50

    50μg

    -20℃避光保存

    425.00

    CM-DiI 活细胞染色剂

    40718ES60

    2×50μg

    -20℃避光保存

    815.00

    CM-DiI 活细胞染色剂

    40718ES72

    5×50μg

    -20℃避光保存

    1545.00


    产品描述

    CM-DilDiI的一种衍生物,通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞,适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性,可用以追踪多次传代细胞的运动特性。其有着强而稳定的红色荧光(Ex/Em=553/570nm),与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性,适合做多重指标染色。CM-Dil可自由穿透质膜进入细胞,从而产生不具有膜渗透性的反应产物。经过几次传代此染料还可完好的维持在活细胞内,染料随着细胞分裂传入子代细胞内,但不会进入相邻细胞。至少在72小时内保持荧光信号(一般可传3~6代)。工作浓度下,此染料无细胞毒性,不会影响细胞活力以及增殖能力。

    Dil相比,CM-Dil水溶性更好一些,便于悬浮细胞和固定细胞染色溶液的制备;CM-Dil携带的CM基团(即氯甲基替代基团)能与多肽及蛋白上的巯基反应从而使该分子在醛类物质中保持稳定。与其他膜染料如DiI和PKH26不同,一些细胞经CM-Dil染色后,可在后续的固定,透化和石蜡包埋处理中维持稳定的标记,因此特别适用于同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化,荧光原位杂交或者电镜观察的实验。

    研究证实,CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定,阳性标记率达98%以上,标记细胞形态良好,能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况;或将标记的细胞注入体内,可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。


    产品性质


    同义名(Synonym)

    3H-Indolium,5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride/

    CAS号(CAS NO.)

    180854-97-1

    分子式(Molecular Formula)

    C68H105Cl2N3O

    分子量(Molecular Weight)

    1051.5

    外观(Appearance)

    红色固体

    Ex/Em

    553nm/570nm

    推荐滤光器(Optical Filters)

    XF23-Omega, 31002-Chroma

    结构式(Structure)

    2.bmp 


    运输与保存方法

    室温运输。

    产品-20 ºC干燥避光保存,有效期一年

    注意事项

    1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    使用方法

    1. 染色液制备

    1)配置DMF,DMSO或EtOH 储存液:储存液用DMF、DMSO或EtOH配浓度1-2mg/mL

    注:未使用的储存液保存在-20分装保存,避免反复冻融。

    2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或D-PBS)稀释储存液,配浓度为1~2 μM的工作液。

    注:最佳的工作液浓度根据不同细胞和自身的实验体系来调整

    2. 细胞标记(悬浮细胞)

    1)在标记前根据实验要求按照上述方法配制好工作液;

    2)建议待标记细胞在染色工作液中于37℃孵育≤5min,再于4℃孵育15min(低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用,有助于染料对质膜的标记,并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性)。

    3)标记完成后,用PBS清洗细胞,并用新鲜培养基重悬细胞。

    注:对于贴壁细胞,可直接就贴壁状态的细胞进行荧光标记,相较于消化处理后的细胞具有更高的活力。

    2. 染色后处理

    1)CM-DiI染色后的细胞直接用3.7% 甲醛(溶于PBS),于37℃固定10min;

    2)室温条件PBS清洗2次,每次5min;

    3)于-20℃中,用丙酮透化处理10min;

    4)室温条件PBS清洗2次,每次5min;并根据自身的实验要求以及细胞类型,进行后续的实验如石蜡包埋-免疫组化分析,电镜分析等。有报道提到,CM-DiI染色后的大鼠嗜铬细胞细胞可兼容2%(w/v)多聚甲醛和0.2%(w/v) Triton X-100的透化作用;从绵阳淋巴细胞内再次纯化的CM-DiI标记细胞,经甲醛固定,石蜡包埋,切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇,以及脱水后仍能维持荧光;