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MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原体检测试剂盒
产品货号:40611ES25
产品规格:25 T
产品价格:¥467.00
类别:支原体检测与去除

说明书下载

  • HB170824


    产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit

    一步法快速支原体检测试剂盒

    40611ES25

    25 T

    -20

    467.00

    40611ES60

    100 T

    -20

    1537.00


    产品描述

    MycAway -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit是利用Yeasen独特的等温扩增技术,专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品,本试剂盒使用更为简便,只需吸取1μL疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中,63°C孵育1小时即可,其主要原理是若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增,使反应液由蓝紫色变成天蓝色,结果肉眼可辨,无需电泳。

    翊圣MycAway -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit可以检测多种支原体,包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响,产生假阴性结果;反应后需开盖电泳检测,增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒完全没有上述缺点,且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。


    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    40611ES25/25T

    40611ES60/100T

    40611-A

    MycAway™-Color A

    600 μL

    600 μL×4

    40611-B

    MycAway-Color B

    25 μL

    25 μL×4

    40611-C                             

    Positive Control

    10 μL

    10 μL×4

    40611-D

    矿物油

    500 μL

    500 μL×4


    运输与保存方法

    冰袋运输。

    -20避光保存,保质期18个月。若较长时间不用,请注意避光保存。


    注意事项

    1)使用本试剂前请仔细阅读说明书。

    2)整个实验,应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样。

    3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    使用方法

    1. 支原体待检样本准备
    贴壁细胞:直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上,且汇合度达到90%左右时取样,此时上清中支原体含量较高,便于检出。
    悬浮细胞:500 g离心5 min后,吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样,此时支原体含量较高,便于检出。

    2. 反应体系

    MycAway -Color从-20 °C取出,溶解后颠倒混匀,瞬时离心确保所有液体落到管底。根据待检测样品量,在配制如下体系(通常一次实验设置一个阴性对照、一个阳性对照):


    单次反应体积 (μL)


    总体积 (μL)

    MycAway -Color A

    24

    × 样品数 × 1.1*

    _____

    MycAway -Color B

    1

    _____

    注:移液器存在误差,配制时请多出10%为保证分装后每管的量。

    3. 加样

    阴性对照:第一支反应管中不加入任何样品,作为阴性对照;

    待测样品:向其余反应管中加入1 μL待测培养上清;
    阳性对照:向最后一个反应管中加入1 μL Positive Control,作为阳性对照。如果反应是在水浴锅中进行,则每管加入20 μL矿物油,以防止液体蒸发导致结果的误差。如果反应是在PCR仪中进行,不需要加矿物油。
    注:实验室中支原体污染十分常见,鉴于本试剂盒反应灵敏,建议用户在超净台中配制反应组分,以免出现假阳性结果。

    4. 反应条件

    将水浴锅或PCR仪设置为63°C,放入反应管,恒温孵育60 min。
           注:本试剂盒所用酶对温度非常敏感,强烈建议使用PCR仪操作;如用水浴锅,应先加热使其达到规定温度后再反应。温差超过2°C,将导致扩增效率降低,使阳性反应无法在说明书规定的时间内达到典型的天蓝色。

    5. 结果判断

    63°C反应60 min后,立刻取出反应管,放于室温。于光线良好的环境中观察反应结果(建议以白纸为背景)。如果反应液仍为蓝紫色,则判定为阴性;若反应液为天蓝色,则判定为阳性。颜色如下图所示,也可以阴性反应管与阳性反应管作对照。
            注:在63°C反应的时间必须准确计时,超过说明书规定的反应时间可能会出现假阳性。反应管不可开盖,否则产生的气溶胶会导致后期检测假阳性的出现。

    图片1.png 

      阴性     阳性


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