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Picogreen dsDNA Quantitation Reagent 双链DNA(dsDNA)定量试剂
产品货号:12641ES01
产品规格:1Kit (100 µL)
产品价格:¥515
类别:文库定量

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Picogreen dsDNA Quantitation Reagent

    双链DNA(dsDNA)定量试剂

    12641ES01

    1Kit (100 µL)

    515.00

    12641ES02

    1Kit (5×100 µL)

    2115.00

    12641ES03

    1Kit (10×100 µL)

    3845.00

    12641ES04

    1Kit (1×1 mL)

    3765.00 

     

    产品描述

    Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料,其仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,因而可用于精确测量多个来源的dsDNA,包括基因组DNA、病毒DNAPCR扩增产物、测序文库等。

    本产品Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势:灵敏度高:可检测低至200 pgdsDNA,节省宝贵样品;特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA易于使用——只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于96384孔板;与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。


    运输和保存方法

    室温运输。4℃避光干燥保存,有效期6个月。


    注意事项

    1Picogreen定量试剂含有DMSO(已知有毒试剂),请小心操作;

    2)尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性,但是该试剂能结合双链DNA,请操作时务必小心;

    3)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。


    应用实例

    【注】:本方法参照2010《中国药典》进行操作。


    1
    、染料工作液的配置

    PicoGreen dsDNA定量试剂取出后回温至室温,该试剂是以100 µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的。实验当天,根据实验用量用1×TE10 mM Tris-HCl1 mM EDTApH 7.5)按1:200 的比例稀释PicoGreen浓缩液。如,要准备足够的操作溶液测定20个样品,可在19.9 mL1×TE 中加入100 μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。

    【注】:1)由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。

    2PicoGreen试剂见光易降解,所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。

    3)溶液最好在配制好数小时内使用,以保证最佳结果。


    2
    、标准品工作液的配制

    λDNA标准品,用无菌TE buffer配制成100 μg/mL的标准品工作液。

    【注】:标准品也可用其他已知浓度的纯化DNA;有一些产品描述可使用小牛胸腺DNA作为标准品,按照我们实际操作经验,并不推荐它作为标准品。


    3
    、标准品工作液稀释

    1母液稀释:使用TE缓冲液将100 μg/mL的标准品稀释为2 μg/mL

    2梯度稀释:参照表1,对DNA标品母液进行梯度稀释。

    标曲制作

    TE体积(μL

    2 μg∕mL DNA标准品母液(μL

    Picogreen染料工作液(μL

    DNA标准品终浓度

    0

    1000

    1000

    1 μg/mL

    900

    100

    1000

    100 ng/mL

    990

    10

    1000

    10 ng/mL

    999

    1

    1000

    1 ng/mL

    1000

    0

    1000

    Blank

     

    3标准曲线的制备:向经稀释的各梯度标准品溶液中加入1 mL染料工作液混匀,避光室温孵育5 min。使用酶标仪或荧光计检测荧光强度(Ex=480 nmEm=520 nm):将溶液加入比色皿或取200 μL加入微孔板,确信不要在样品中引入气泡;以1×TE缓冲液空白对照,测定标准品荧光值;用标准品溶液的浓度(ng/mL)对应的荧光强度作直线回归,制备标准曲线。

    4测量剩余样品的荧光值。荧光计将给出一个直接的浓度读数,数据可以用来产生DNA浓度的标准曲线。

     

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