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Hieff NGS® DNA Selection Beads 分选磁珠(完美替代AMPure XP Beads)
产品货号:12601ES03
产品规格:1 mL
产品价格:¥296
类别:磁珠

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  • 产品信息

     

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® DNA Selection Beads

    DNA分选磁珠

    12601ES03

    1 mL

    296.00

    12601ES08

    5 mL

    986.00

    12601ES56

    60 mL

    6286.00

    12601ES75

    450 mL

    26186.00 



    产品描述

    Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,配合精心优化过的缓冲体系,可用于二代测序文库构建过程中的DNA片段分选、纯化。本产品可适用于各品牌的DNARNA建库试剂盒,和目前广泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同,片段回收效率和文库大小分布均与AMPure XP Beads高度吻合。



    运输与保存方法

    冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!


    注意事项

    1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2)磁珠使用前须在室温平衡至少30 min

    380%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。

    4)进行长度分选时,初始样品体积需≥100 μL,不足时请用超纯水补齐。样品体积太小,将导致移液误差增大,进而影响分选的准确性。


    使用方法

    1. 准备工作

    将磁珠由冰箱中取出,室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。


    2. 
    长度分选(双轮法)

    长度分选操作流程如1所示,具体操作如下。                                                                 image.png

    1双轮分选操作流程

    1)请涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证混匀。

    2)根据要求,参考1DNA溶液中加入第一轮分选磁珠,涡旋混匀或移液器吹打10次混匀。

    3)室温孵育5 min

    4)将离心管短暂离心并置于磁力架中,待溶液澄清后(约5 min),小心转移上清到干净的离心管中。

    注意:转移上清时,请残留2 μL液体于管底,切勿全部吸出上清,避免吸到磁珠并影响分选效果。

    举例:当初始体积为100 μL,第一轮使用0.8×比例,即加入80 μL磁珠,推荐吸出178 μL的上清。

    5)参考1向上清中加入第二轮分选磁珠。

    6)涡旋混匀或移液器吹打10次混匀,室温静置5 min

    7)将离心管短暂离心并置于磁力架中,待溶液澄清后(约5 min),小心移除上清。

    8)保持离心管始终处于磁力架中,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠,室温孵育30 sec,小心移除上清。

    9)重复步骤8

    10)保持离心管始终处于磁力架中,开盖干燥磁珠至刚刚出现龟裂(约5 min)。

    注意:切记磁珠不要干燥时间太久,磁珠干燥过度将影响纯化效果。

    11)将离心管从磁力架中取出,加入适量ddH2O≥20 μL),涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打充分混匀,室温孵育5 min

    12)将离心管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体。待溶液澄清后(约5 min),小心吸取上清至干净的管中,即完成分选。


    3. DNA
    片段分选参考条件

    通过超声法将小牛胸腺DNA进行片段化,制备100-1000 bpSmear片段,根据表1进行双轮分选。结果使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析(2)。

    1磁珠文库分选推荐比例

    DNA片段大小

    250-350 bp

    320-420 bp

    450-550 bp

    550-700 bp

    700-900 bp

    800-1000 bp

    第一轮体积比(Beads:DNA

    0.80×

    0.70×

    0.60×

    0.55×

    0.50×

    0.45×

    第二轮体积比(Beads:DNA

    0.20×

    0.20×

    0.20×

    0.15×

    0.15×

    0.15×


    注:表中
    “×”表示样品DNA体积。如DNA片段大小为300 bp,样品DNA体积为100 mL,则第一轮分选磁珠使用体积为0.80×100 mL=80 mL;第二轮分选磁珠使用体积为0.20×100 mL=20 mL 

     

    微信图片_20190131164814.png 微信图片_20190131164819.png


    2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram

    Smear fragments溶于ddH2O,使用0.80×/0.20×0.45×/0.15×磁珠进行片段分选


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