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2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix(No dye)
产品货号:10112ES03
产品规格:1 mL
产品价格:¥96.00
类别:热启动PCR

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    2×Hieff UNICON®   HotStart PCR Master Mix (No Dye)

    10112ES03

    1 mL

    96.00

    2×Hieff UNICON®   HotStart PCR Master Mix (No Dye)

    10112ES08

    5×1 mL

    432.00


    产品描述

    2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有Hieff UNICON® HotStart Taq DNA PolymerasedNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,可以高通量操作并提高实验结果的重现性。Hieff UNICON® HotStart DNA Polymerase 的激活时间只需要2-3 min,兼容现有的 PCR 程序。本产品防止了在样品准备阶段产生非特异扩增,可以有效地进行基因克隆和分型实验。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。预混液中不含染料。


    产品应用

    低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR


    质量控制

    核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA –Hind III37℃下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。


    运输与保存方法

    冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。


    注意事项

    为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。


    PCR反应体系(50 μL)

    组分

    体积

    终浓度

    ddH2O

    to 50 μL

    -

    模板DNA

    适量

    -

    Primer正向 (10 μM)

    2 μL

    0.4 μM

    Primer反向 (10 μM)

    2 μL

    0.4 μM

    2×Hieff UNICON®   HotStart PCR Master Mix(No Dye)

    25 μL


    【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。

    模板种类

    模板使用量

    基因组DNA

    50 ng-200 ng

    质粒DNA

    100 pg-20 ng

    cDNA

    1-5 μL (不超过反应体系的1/10)


    PCR扩增程序

    循环步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    95℃

    5 min

    1

    变性

    95℃

    30 sec


    退火

    50-60℃

    30 sec

    35

    延伸

    72℃

    30 sec/kb


    终延伸

    72℃

    10 min

    1

    【注】:
    1退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。

    2延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb

         3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。


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    产品名称                                                           

    货号

    规格

    价格(元)

    Hieff® Hot Start DNA Polymerase    配体法热启动DNA聚合酶

    10110ES72/80

    250/1000 U

    186/636

    Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase    抗体法热启动Taq酶

    10113ES60/76

    100/500 U

    216/656

    2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (With Dye)

    10111ES03/08

    1/5×1 mL

    96/432

    HB190221