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400-6111-883
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400-6111-883
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
产品货号:11208ES03
产品规格:1 mL
产品价格:¥1365.00
类别:探针法

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

    11208ES03

    1 mL

    1365.00

    Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

    11208ES08

    5 mL

    5565.00

    Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

    11208ES60

    20×5 mL

    91265.00 


    产品描述


    本产品是2×Mix预混合试剂,能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶,极大地提高了扩增灵敏度和特异性,本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化,能够提高反应的扩增效率,促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。


    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    11208ES03(1 mL

    11208ES08(5 mL

    11208-A

    Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

    1 mL

    1 mL × 5

    11208-B

    50×Low Rox

    40 μL

    200 μL

    11208-C

    50×High Rox

    40 μL

    200 μL


    运输与保存方式


    冰袋运输,-20℃储存;有效期18个月。


    反应体系

    反应组分

    体积(μL

    终浓度

    Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

    10

    1×

    Primer Mix

    x

    0.1-1 μM

    TaqMan Probe Mix

    y

    50 nM-300 nM

    50×High or Low Rox

    0.4

    模板DNA/cDNA

    1-100 ng

    -

    ddH2O

    up to 20

    -


    注:
    1)上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量,可根据具体实验情况进行调整,选择最适投入量和浓度;

    2)一般情况下,每条引物浓度为0.2 μM即可得到较好的扩增效果,引物浓度可在0.1-1 μM的范围内进行调节;

    3)反应体系可根据实验需求进行等比例调节,模板体积不超过总体积的1/10。

    扩增程序

    循环步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    95℃

    5 min

    1

    变性

    95℃

    5 s

    40

    退火/延伸

    60℃

    30 s

    注:
    1)某些情况下,可通过调节退火延伸时间提高多重qPCR反应的性能。

    2)反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性。


    注意事项

    一、关于操作

    1)请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀,短暂离心收集至管底后置于冰上备用。

    2)为避免样品间交叉污染和气溶胶污染,推荐在超净台中进行反应体系的配制。

    3)使用过程中避免产品的反复冻融。

    4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    二、实验方法

    a:引物设计

    1. 引物必须具有特异性。

    2. 引物的Tm值必须在58-60℃,而且各组引物的Tm差异应控制在1-2℃。

    3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。

    b:探针设计

    1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10℃(68-70℃)。

    2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。

    3. 如果使用的是MGB探针,确保多重反应体系中不超过2条MGB探针。


    实验案例

    检测HEK293T细胞A1、A2、A3、A4基因10倍梯度浓度扩增。

    一、反应体系配制

    反应组分

    体积(μL

    终浓度

    Hieff   Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

    10

    Primer Mix

    0.5

    250 nM

    TaqMan Probe Mix

    0.5

    250 nM

    50×High   or Low Rox

    0.4

    HEK293T细胞基因组

    0.2 ng~200 ng

    -

    ddH2O

    up to 20

    -

    二、扩增程序
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    三、实验结果
    QQ图片20180920171317.png


    文本框: 绿色:A1 红色:A2 黄色:A3 蓝色:A4

    图1:本产品能够有效进行多重定量PCR反应。参检基因的扩增效率在95%-105%之间。

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    货号

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