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0.4% Typan Blue Solution 台盼蓝染色液(0.4%)
产品货号:40207ES20
产品规格:20mL
产品价格:¥73.00
类别:细胞增殖与毒性

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    0.4% Typan Blue Solution 台盼蓝染色液(0.4%)

    40207ES20

    20mL

    73.00

    0.4% Typan Blue Solution 台盼蓝染色液(0.4%)

    40207ES60

    100mL

    193.00


    产品描述

    台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。

    本品为溶于生理盐溶液的0.4%w/v)台盼蓝染色液,以无菌形式提供,细胞培养级别。


    运输和保存方法

    室温运输和保存即可,二年有效。


    注意事项

    1)细胞计数前,需要用生理盐缓冲液或者无血清培养基对细胞进行充分的清洗,因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力,残留的血清蛋白会导致较暗的染色背景。

    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    使用方法

    1)对于悬浮细胞,离心收集细胞,充分清洗后,用适当缓冲液如PBSHBSS重悬制成单细胞悬液;对于贴壁细胞,先用胰酶消化细胞,再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。

    2)取0.5mL单细胞悬液,按照1:1比例与0.5mL 0.4%台盼蓝染色液充分混匀,室温染色3~10min

    【注1】:因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。

    【注2】:若细胞密度比较高,可取0.2mL单细胞悬液,经适当缓冲液稀释到0.5mL,之后再用0.5mL0.4%台盼蓝染色液染色。

    3)取少量上述染色细胞加入血细胞计数板,于显微镜低倍镜下计数,分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞)和总细胞。

    【注1】:用移液枪加染色细胞时,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。

    【注2】:1mm2方格内细胞数通常控制在20-50 cells,当细胞数超过200个,需重新调整稀释倍数。

    4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,

    a,计算每mL细胞数目:Cells/mL=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104;【注】:此时的稀释倍数为:步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数

    b,总细胞数目:Total cells=Cells/mL×最初制备单细胞悬液的总体积

    c,细胞活力值:Viability%=(总细胞数-总着色细胞数)/总细胞数 ×100

    【注】:通常情况,健康的对数期培养细胞,活细胞至少占到95%


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    产品编号

    产品名称

    规格

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    HB181204