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Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free)
产品货号:13278ES50
产品规格:100 T
产品价格:¥875.00
类别:多重PCR

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free)

    13278ES50

    100 T

    875.00

    Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free)

    13278ES76

    500 T

    3165.00


    产品描述

    本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free)由多重PCR酶制剂与不含Mg2+2×扩增缓冲液组成,在进行扩增反应时,可在反应体系中根据需求添加适量Mg2+。该产品的扩增具有高均一性、高特异性和高灵敏度的特点,可以对20对及以上引物体系进行特异、均一的扩增反应。


    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    13278ES50 (100T)

    13278ES76 (500T)

    13278-A

    Hieff® Multiplex PCR Enzyme

    2×50 μL

    10×50 μL

    13278-B

    2×Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free)

    2×1.25 mL

    10×1.25 mL

    13278-C

    MgCl2 (25 mM)

    2×500 μL 

    5×1 mL

    【注:13278-A组分避免反复冻融。


    运输与保存
    方式

    冰袋运输-20储存,有效期1年。

    反应体系

    组分

    体积 (μL)

    终浓

    2×Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free)

    25

    1×

    Hieff® Multiplex PCR Enzyme

    1

    -

    Primer mix

    x

    0.1 μM-0.5 μM

    模板DNA

    DNA总量:1 ng-200 ng

    -

    MgCl2(25 mM)

    y

    1-5 mM

    无菌超纯水

    up to 50

    -

    【注】: 1)DNA量和引物浓度均为推荐起始投入量和浓度,可根据具体实验情况进行调整,选择最适投入量和浓度;
    2)引物浓度:建议每条引物的浓度在0.1 μM-0.5 μM参考范围内进行调整;

    3)Hieff® Multiplex PCR Buffer(Mg2+ free)中已经包含扩增所需要的dNTP、盐离子等,但不包含Mg2+,需在反应体系中根据实验需求添加适量Mg2+

     

    扩增程序

    循环步骤

    温度(

    时间

    循环数

    预变性

    94

    1 min

    1

    变性

    94

    30 sec

    15-45

    退火

    50-60

    60 sec

    延伸

    72

    60 sec/kb

    终延伸

    72

    10 min

    1

    【注】: 1)PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应(设置热盖温度至105左右)

           2)使用本产品获得的扩增产物需添加Loading buffer后用于电泳检测。

           3)延伸时间以最长扩增片段为准,可适当延长延伸时间,但要避免过长时间带来的非特异性扩增。

    实验案例分享

    以人基因组DNA为模板,使用10对引物进行多重PCR反应,分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。

    扩增体系配制

    扩增程序设置

    组分

    体积

    终浓


    循环步骤

    温度

    时间

    循环数

    Hieff® Multiplex PCR Buffer

    (Mg2+ free)

    25 μL 

    1×


    预变性

    94

    1 min

    1

    Hieff® Multiplex PCR Enzyme

    1 μL

    -


    变性

    94

    30 sec

    35

    Primer mix

    10 μL

    0.1 μM-0.5 μM


    退火

    60

    60 sec

    模板DNA(100 ng/μL

    1 μL

    2 ng/μL


    延伸

    72

    60 sec

    MgCl2(25 mM)

    5 μL

    2.5 mM


    终延伸

    72

    10 min

    1

    无菌超纯水

    to 50 μL

    -






    电泳检测

    2%琼脂糖凝胶;130 V;电泳时间1 h。

    实验结果

    image.png 

    Lane 1:100bp DNA marker

    Lane 2-3:10重PCR产物

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    货号

    规格

    促销价(元)

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    10138ES03/08/25/76

    1ml/5ml/25ml/500ml

    625/2355/4255/72355

    HB181214