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ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色荧光探针(活细胞)
产品货号:40761ES50
产品规格:50 µL
产品价格:¥499.00
类别:荧光探针/细胞染色

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  • HB171031


    产品信息

    产品名称      

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    ER-Tracker Blue-White DPX,for live-cell imaging 
    内质网蓝色荧光探针(活细胞)

    40761ES50

    50 µL

    ≤-20℃避光

    499.00


    产品描述

    ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。

    本品为ER-Tracker Blue-White DPX,Ex= 374 nm,Em= 430-640 nm,蓝色荧光,属于DapoxylTM(DPX)家族成员之一。DPX系列染料均具有长发射波长、高吸光系数、高量子产量、较大斯托克司频移等特点。但这些染料具有环境敏感性,会随之出现极性增强、最大荧光波长偏移到更高波长处、量子产量下降等现象。

    本品为溶于DMSO的1 mM ER-Tracker Blue-White DPX储存液,推荐工作浓度为100 nM-1 μM。


    产品性质

    分子式(Formula)

    C26H21F5N4O4S

    分子量(Molecular Weight)

    580.53

    外观(Appearance)

    Yellow Solution

    Ex/Em

    374/430-640 nm

    滤片(Filter)

    DAPI or UV longpass

    结构式(Structure)

    1.jpg


    运输和保存方法

    冰袋运输。≤-20℃避干燥保存,一年效期。避免反复冻融。


    注意事项

    1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱。

    2)DMSO有毒,请小心操作。

    3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    使用方法

    本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化,且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其最佳使用条件不同,还需用户根据该方案进行进一步优化。

    1. 试剂准备

    使用前将ER-Tracker Blue-White DPX 回温至室温,并简短离心使该DMSO溶液至管底。

    2. 细胞样品处理及染色

    2.1 将1 mM ER-Tracker Blue-White DPX储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度100 nM-1µM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。

    注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg)稀释该探针进行染色,可得到最佳实验结果。

    2.2 染色

    对于贴壁细胞,吸除培养皿中培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15-30 min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养液,并在荧光显微镜下观察细胞。
            注:由于ER-Tracker Blue-White DPX探针具有较高光敏感性,会产生波动较大的发射吸收峰值,使用长通DAPI滤光片效果最理想。 另,操作过程中需尽量避光。

    细胞如需固定,请参考以下步骤。

    3. 细胞固定及透化处理

    3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞10-20 min。

    注:已染色细胞用醛固定后,仅部分ER-Tracker Blue-White DPX留在细胞内,荧光信号会有部分衰减。

    3.2 (可选)透化处理:若细胞还需进行后续染色,需对细胞利用0.2% TritonX-100 透化10 min。

    3.3 清洗观察细胞:细胞固定后,可用合适缓冲液进行清洗,每次5 min,共2次。镜检即可。


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