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DAPI 4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐
产品货号:40727ES10
产品规格:10mg
产品价格:¥459.00
类别:荧光探针/细胞染色

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  • HB171206

    产品信息

    产品名称

    产品编号

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    价格(元)

    DAPI  4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

    40727ES10

    10mg

    黄色粉末

    4℃避光

    459.00  


    产品描述

    DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种常用的核酸染料,可以和双链DNA富含AT序列的小沟结合,产生比自身强20多倍的蓝色荧光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI也可对RNA进行染色,染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358nm/461nm),DAPI-RNA具有较长的最大发射波长(500nm),其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。

    尽管DAPI不能通过活细胞膜,但可以通过提高浓度使之进入活细胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色体DNA。

    DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色、黄色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术,因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接免疫检测等领域,其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。推荐工作浓度为0.5-10μg/L


    产品性质

    中文名称(Chinese Synonym)

    4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

    英文名称(English Synonym)

    2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine   dihydrochloride; DAPI dihydrochloride 4’,6-Diamidino-2-phenylindole,   dihydrochloride;

    分子式(Molecular Fomular)

    C16H15N5 ·2HCl

    分子量(Molecular Weight)

    350.25

    CAS号(CAS NO.)

    28718-90-3

    纯度(Purity)HPLC

    ≥98%

    荧光光谱(Fluorescence Spectral)

    DAPI的Ex/Em=340nm/488nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358nm/461nm

    结构式(Structure)

    1.jpg


    运输与保存方法

    常温运输。粉末于4℃保存,需避光储存,有效期3年。


    注意事项

    1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

    2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

    3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

    4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 


    配制母液

    用双蒸水溶解,终浓度为1-5mg/mL。本产品不可以用缓冲液直接溶解。-20ºC可保存1年,建议分装保存,避免反复冻融。


    使用方法

    1. 配制工作液:用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10μg/mL),工作液可于4℃保存6个月。
    2. 固定的细胞或组织染色:对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。

    a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。

    对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。 

    b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。

    c直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。

    3. 活细胞或组织染色:
    a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100μL染色液。 

    b)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。

    c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

    d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。


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