PNGase F (N-糖苷酶 F)是一种酰胺水解酶,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白,特异性除去N-连接糖,但常规PNGase F酶促反应释放抗体N-聚糖需要长达几小时,同时由于聚糖释放存在偏好性,不完全的去糖基化可能导致结果的偏差,所获得的聚糖分布不能代表治疗性抗体的正确组成。因此,尽量在最短时间内获得准确的 N-糖链糖谱对于抗体及抗体融合蛋白等生物治疗剂生产过程中糖基化监测至关重要。
翌圣Fast PNGase F(Non-Reducing), N-糖苷酶 F(快速版,非还原)是一种经过优化的重组试剂,可在保留二硫键的同时,在数分钟内对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白进行彻底和快速的去糖基化。具备Fast PNGase F, N-糖苷酶 F(快速版)(Cat#20406ES)反应速度快的优点,同时提供非还原性反应条件,保留蛋白质的四级结构,适用于高通量蛋白质组学应用和质谱表征分析抗体的方法,如完整蛋白质谱分析。
产品信息
编号 | 组分名称 | 20404ES20 | 20404ES50 |
20404-A | Fast PNGase F(Non-Reducing) | 20 μL | 50 μL |
20404-B | Fast PNGase F(Non-Reducing)Buffer (5×) | 80 μL | 200 μL |
另外,我司还提供常规PNGase F,如PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)(Cat#20407ES)、PNGase F(Glycerol-free), N-糖苷酶 F(无甘油,100000 U/mL)(Cat#20405ES)、PNGase F, N-糖苷酶 F (750000 U/mL)(Cat#20415ES),以及其他类型的糖苷酶,如Endo H糖苷内切酶H(Cat#20414ES)、Endo S糖苷内切酶S(Cat#20413ES)。
中文别名(Chinese synonym) | N-糖苷酶 F(快速版,非还原);肽N-糖苷酶 F(快速版,非还原) |
英文别名(English synonym) | Fast PNGase F(Non-Reducing) |
来源(Source) | 酵母重组表达 |
缓冲液组分(Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA |
1)将10~100 μg的抗体和H2O混合至15 μL的总体积;
2)加入4 μL的Fast PNGase F (Non-Reducing)Buffer (5x),使总反应体积为19 μL;
3)在75°C孵育5分钟,冷却至室温;
4) 加入1 μL Fast PNGase F(Non-Reducing);
5) 在50°C孵育10分钟。
2~8℃保存,有效期1年,严禁冻存。