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DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞
产品货号:11802ES80
产品规格:10×100 μL
产品价格:¥166.00
类别:感受态制备

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  • 产品信息

    产品名称      

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞

    11802ES80

    10×100 μL

    -80℃

    166.00

    DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞

    11802ES92

    100×100 μL

    -80℃

    1236.00


    产品描述

    本品是采用DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传,适用于蓝白斑筛选。DH5α细胞重组酶recA1和核酸内切酶endA1基因缺失突变使其能保证克隆DNA的稳定性。使用pUC19质粒检测,转化效率约达108 cfu/μg DNA。

    DH5α细胞基因型:F - φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17 (rk-,mk+ ) supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA


    产品组分

    编号

    组分

    规格

    11802-A

    DH5α   感受态细胞

    10×100 μL

    100×100 μL

    11802-B

    pUC19   (0.1 ng/μL)

    1×5 μL

    10×5 μL


    运输与保存方法

    干冰运输;

    DH5α 感受态细胞-80℃保存,有效期6个月。

    pUC19质粒-20℃保存。


    注意事项

    1. 本产品应保存在-80℃,不可反复冻融,以免降低感受态细胞的转化效率。

    2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长,感受态细胞刚化冻时转化效率最高。

    3. 本产品使用传统转化方法转化效率约108 cfu/μg DNA,使用快速转化方法转化效率约107 cfu/μg DNA。


    使用方法(快速转化方法)

    1. 取100 μL感受态细胞冰浴解冻。
    注:感受态细胞的建议用量为50-100 μL,解冻后的感受态细胞不建议二次使用。

    2. 向感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管混匀,冰浴静置5 min。(传统:30 min)
    注:所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
    3. 42℃水浴中热激30 s,然后快速将EP管转移到冰上,静置2 min。(热激时间不要超过30 s)

    4. 向感受态细胞中加入100 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基,混匀。(传统:37℃摇床温育45 min)

    5. 将全部菌液涂布至培养板中,37℃培养12-16 h。


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