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TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞
产品货号:11801ES80
产品规格:10×100 μL
产品价格:¥166.00
类别:感受态制备

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  • 产品信息

    产品名称       

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞

    11801ES80

    10×100   μL

    -80℃

    166.00

    TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞

    11801ES92

    100×100   μL

    -80℃

    1236.00


    产品描述

    本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。可用于构建克隆,蓝白斑筛选等,具有链霉素(StrR )抗性。

    TOP10感受态细胞基因型:F-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) 80lacZ△M15 lac X74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (StrR ) endA1 nupG


    产品组分

    编号

    组分

    规格

    11801-A

    TOP10 感受态细胞

    10×100 μL

    100×100 μL

    11801-B

    pUC19 (0.1   ng/μL)

    1×5 μL

    10×5 μL


    运输与保存方法

    干冰运输;

    TOP10感受态细胞-80℃保存,有效期6个月。

    pUC19质粒-20℃保存。


    注意事项

    1. 本产品应保存在-80℃,不可反复冻融,以免降低感受态细胞的转化效率。

    2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长,感受态细胞刚化冻时转化效率最高。

    3. 本产品使用传统转化方法转化效率约108 cfu/μg DNA,使用快速转化方法转化效率约107 cfu/μg DNA。


    使用方法(快速转化方法)

    1. 取100 μL感受态细胞冰浴解冻。
    注:感受态细胞的建议用量为50-100 μL,解冻后的感受态细胞不建议二次使用。

    2. 向感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管混匀,冰浴静置5 min。(传统:30 min)
    注:所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
    3. 42℃水浴中热激30 s,然后快速将EP管转移到冰上,静置2 min。(热激时间不要超过30 s)

    4. 向感受态细胞中加入100 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基,混匀。(传统:37℃摇床温育45 min)

    5. 将全部菌液涂布至培养板中,37℃培养12-16 h。


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