DAPT (GSI-IX)是一种新型γ-secretase（γ-分泌酶）抑制剂，抑制细胞中总Aβ和Aβ42的产生，进而影响细胞信号传导和细胞分化。DAPT作用于HEK 293细胞时，降低HEK 293细胞中全部Aβ产量，在HEK 293细胞中IC50为20 nM。DAPT作用于原代培养的人神经细胞时，抑制人神经细胞中Aβ和Aβ42的产生，IC50分别为115 nM和200 nM，比作用于HEK 293细胞时低5-10倍。

研究显示，DAPT抑制SK-MES-1细胞增殖，这种作用存在浓度依赖性，IC50为11.265 μM。此外, DAPT作用于肺鳞状细胞癌细胞，通过抑制Notch受体信号通路，也诱导依赖型和非依赖型细胞凋亡。DAPT降低CBA-lprg小鼠的淋巴组织增生以及MRL-lprr小鼠自身免疫性，另外在体内表现出几个月的耐药性，因此DAPT很有可能成为ALPS和红斑狼疮（SLE）临床试验中的有效候选药物。

 

产品性质

英文名称（English Synonym）	DAPT; LY-374973
化学名称（Chemcial Synonym）	Tert-butyl(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-(3,5-difluorophenyl)acetyl]amino]propanoyl]amino]-2-phenylacetate
CAS号（CAS NO.）	208255-80-5
分子式（Formula）	C23H26F2N2O4
分子量（Molecular Weight）	432.46
外观（Appearance）	粉末
纯度（Purity）	≥98%
溶解性（Solubility）	易溶于DMSO ( 20 mg/mL )
结构式（Structure）

 

运输和保存方法

冰袋运输。粉末直接保存于-20 ºC，有效期2年。DMSO溶解配制储存液（20 mg/mL）,建议分装后-20 ºC避光保存，避免反复冻存，至少可存放6个月。

 

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前请先短暂离心，以保证产品全在管底。

3）本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。

 

使用浓度

 

【DAPT具体使用浓度请参考相关文献，并根据自身实验条件（如实验目的，细胞种类，培养特性等）进行摸索和优化。】

 

相关实验（数据来自于公开发表的文献，仅供参考）

（一）DAPT对Aβ的抑制作用

为检测DAPT对Aβ的抑制作用，分别用不同浓度DAPT（0、0.4、2、10、50、250 nM）处理HEK293细胞，使用标准ELISA(266-3D6)分析全部Aβ，发现DAPT以浓度依赖的方式抑制Aβ，表示为抑制百分数，同时不影响APPα水平。为检测DAPT在体内的作用效力，用100 mg/kg DAPT对PDAPP小鼠进行皮下注射，3 h后小鼠脑中DAPT水平达到峰值（490 ng/g），在18 h时仍高于100 ng/g (~200 nM)，同样地，脑皮层总Aβ在1-18 h内也显著下降。为检测DAPT在体内的选择性，给小鼠皮下注射100 mg/kg DAPT 3 h，脑皮层总Aβ降低45%。^[2]

（二）DAPT阻断Notch信号效率

为检测DAPT在人-鼠杂交的胚胎胸腺器官培养（FTOC）细胞中阻断Notch信号的效率，将不同浓度的DAPT（2、5、10 μM）加入到细胞培养液中，发现DAPT以剂量依赖的方式抑制HES1。并使用不同浓度（2、5、10 μM）DAPT培养人CD34+Lin—脐带血前体细胞的胚胎胸腺器官，进一步检测DAPT对人细胞结构和细胞数量的影响，发现2 μM和10 μM的 DAPT处理FTOC 28天后，FTOC中产生的人细胞数量没有显著改变，但是5 μM DAPT处理的FTOC中总细胞数量明显降低。另外，2 μM和5 μM DAPT处理后，CD34+细胞频率和数量显著减少（超过50%），10 μM处理后，细胞频率和数量更低，但不显著。^[3] 

（三）DAPT诱导CDK5的表达

为检测DAPT对CDK5的表达和活性的影响作用，使用10 μM的DAPT对大鼠皮层神经细胞处理24 h，与对照组相比，DAPT处理的神经细胞中，CDK5蛋白水平显著提高，但p35水平并没有明显变化。^[4]

 

参考文献

[1] Dovey HF, John V et al. Functional gamma-secretase inhibitors reduce beta-amyloid peptide levels in brain. J Neurochem. 2001, 76(1), 173-181.

[2] Li S, et al. DAPT protects brain against cerebral ischemia by down-regulating the expression of Notch 1 and nuclear factor κB in rats. Neurol Sci. 2012 ,33(6):1257-64.

[3] Zhou JX, et al. γ-secretase inhibition combined with cisplatin enhances apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells.Exp Ther Med. 2012 Feb; 3(2):357-361.

[4] Nasoohi S, et al. The γ-secretase blocker DAPT impairs recovery from lipopolysaccharide-induced inflammation in rat brain.Neuroscience. 2012, 210, 99-109.

 

HB211214