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400-6111-883
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400-6111-883
DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针
产品货号:40725ES10
产品规格:10 mg
产品价格:¥488.00
类别:荧光探针/细胞染色

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  • HB170616

    产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针

    40725ES10

    10   mg

    -20   ºC

    488.00

    DiO   (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针

    40725ES25

    25   mg

    -20   ºC

    988.00


    产品描述

    DiO是一种亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。进入细胞膜后,DiO在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的FITC滤光片检测。

    DiO通常不会明显影响细胞的生存力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。


    产品性质

    同义名(Synonym)

    DiOC18(3); DiO perchlorate;   3,3-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate

    CAS 号(CAS NO.)

    34215-57-1

    分子式(Molecular Fomular)

    C53H85ClN2O6

    分子量(Molecular Weight)

    881.72

    外观(Appearance)

    橘色至红色固体

    Ex/Em

    484/501 nm

    推荐滤光器(Filter)

    XF23-Omega, 31001-Chroma

    纯度(Purity)

    >97%

    溶解性(Solubility)

    溶于DMF,DMSO,乙醇

    结构式(Structure)

    2-3.jpg


    运输与保存方法

    冰袋运输。产品-20 ºC干燥避光保存,有效期1年。


    注意事项

    1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
    2)染色固定的细胞或组织时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛固定,使用其它不适当固定液会导致荧光背景较高。

    3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    使用方法

    1. 染色液制备

    (1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~2 mM。

    注:
    a、未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,可稳定保存6个月。   
    b、发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
    c、必须保证所用溶剂新鲜无水。

    (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。
    注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。

    2. 悬浮细胞染色

    (1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
    (2)37℃孵育细胞2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20 min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

    (3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5 min。

    (4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

    (5)重复(3),(4)步骤两次以上。

    3. 贴壁细胞的染色

    (1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

    (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

    (3)在盖玻片的一角加入100 μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
    (4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

    (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10 min,然后吸干培养基。

    4. 显微镜检测

    (1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。

    (2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

    a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

    b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

    c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

    表1 相关产品性质

    产品名称

    货号

    分子量

    Ex/Em

    推荐滤光器

    DiO

    40725ES10

    881.7

    484/501   nm

    XF23-Omega, 31001-Chroma

    DiI  

    40726ES10

    933.87

    550/567 nm

    XF32-Omega, 31002-Chroma

    DiD

    40758ES25

    959.91

    644/663 nm

    XF47-Omega, 31023-Chroma

    DiR

    40757ES25

    1013.39

    748/780 nm

    XF112-Omega,41009-Chroma