您好,欢迎来到上海翊圣生物科技有限公司官方网站!
400-6111-883
| EN
400-6111-883
产品中心
Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile 热敏UDG
产品货号:10303ES60
产品规格:100 U
产品价格:¥683.00
类别:PCR相关

说明书下载

  • 产品信

    产品名称          

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile

    热敏UDG

    10303ES60

    100 U

    683.00

    10303ES76

    500 U

    3083.00


    产品描述

    热敏UDG(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。


    产品组份

    编号

    组分

    产品编号/规格

    10303ES60(100 U)

    10303ES76500 U

    10303

    Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile(1 U/μL)

    100 μL

    500 μL


    产品应用

    1)去除含dU的PCR产物气溶胶污染。

    2)去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。


    酶活定义

    25℃,30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。


    失活方式

    94℃,2-5 min


    运输储存方法

    干冰运输。

    -20℃保存,有效期一年。


    注意事项

    1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。 


    质量控制

    核酸内外切酶残留检测:10 U的本酶和0.6 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

    RNase残留检测:10 U的本酶和1 μg HeLa细胞总RNA37℃下孵育1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。

    大肠杆菌DNA残留检测:10U本品经E.coli 16s rDNA特异性的TaqMan qPCR检测,E.coli基因组残留低于10拷贝。

    酶失活检测:10U本品经94℃处理2min,与1μg含dU的dsDNA模板温育30min,DNA的电泳谱带不发生变化。


    应用实例

    1. 按下列组份配制PCR反应液:

    试剂

    体积

    10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

    5 μL

    25 mM MgCl2

    3 μL

    dUTP

    0.6 mM

    dCTP / dGTP/ dATP

    0.2 mM each

    模板DNA

    Optional

    引物1(10 μM)

    2 μL

    引物210 μM

    2 μL

    Taq DNA Polymerase5 U/μL

    0.5 μL

    Heat-Labile UDG1 U/μL

    1 μL

    ddH2O

    To 50 μL

    备注:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP


    2. PCR
    反应:

    反应温度

    反应时间

    循环数

    目的

    25

    10 min

    1

    降解含U模板

    94℃

    2 min

    1

    UDG酶失活,模板预变性

    95℃

    10 sec

    30-35

    变性

    60℃

    20 sec

    退火

    72℃

    30 sec/kb

    延伸

    72℃

    5 min

    1

    终延伸

    备注:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10min内调整。

     

     

    HB190128