您好,欢迎来到上海翊圣生物科技有限公司官方网站!
400-6111-883
| EN
400-6111-883
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module 快速DNA连接模块
产品货号:12607ES24
产品规格:24T
产品价格:¥3263
类别:磁珠与模块

说明书下载

  • 产品信息


    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module

    快速DNA连接模块

    12607ES24

    24T

    3263.00

    12607ES96

    96T

    10863.00


    产品描述

    Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module是针对Illumina®高通量测序平台文库构建专业设计的DNA连接模块。本产品可在双链平末端DNA片段或双链3´-dA DNA片段的两端连接Illumina®测序平台适用的DNA接头,具有连接效率高、简便、可实现自动化等优势。本产品已与Hieff NGS® End Repair/dA-Tailing Module(Cat#12608),2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12621)共同用于DNA文库构建,通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分,都经过严格的质量与功能验证,最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。


    产品组分

    产品编号

    组分名称

    规格

    12607ES24

    12607ES96

    12607-A

    Fast-Pace T4 DNA Ligase

    120 μL

    480 μL

    12607-B

    5×Fast-Pace Ligation Buffer

    480 μL

    960×2 μL

    质量控制

    Fast Pace T4 DNA Ligase

    1. SDS-PAGE纯度:>95%。
    2. 16小时孵育检测:50 μL反应体系中包含5μl本酶和1 μg HindIII-λDNA,37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解;50 μL反应体系中包含5μl本酶和1 μg T3 DNA,37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解。
    3. RNase活性:5μl本酶中加入40 ng FAM-RNA及,37°C下孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,条带无降解。
    4. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中加入5μl本酶和1 μg φX174 RF I DNA,37°C下孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%。
    5. 核酸外切酶活性:50 μL反应体系中加入至少5μl本酶和1 μg声振的[3H]DNA(105 cpm/μg),37°C下孵育4小时,释放的放射性<0.1%。
    6. 功能活性(平末端连接):50 μL反应体系,在1×Fast Pace Ligation Buffer中,加入0.5 µL Fast Pace T4 DNA Ligase,18 μg HaeIII φX174,16°C孵育7.5分钟。经琼脂糖电泳检测,片段连接率>95%。
    7. 功能活性(接头连接):50 μL反应体系,在1×Fast Pace Ligation Buffer中,加入0.125 µL Fast Pace T4 DNA Ligase,8 nmol 12 bp接头,16°C孵育过夜。经琼脂糖电泳检测,无明显未连接接头。

    Fast Pace Ligation Buffer
    1. 16小时孵育检测:50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer和1 μg HindIII-λDNA,37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解;50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer和1 μg T3 DNA,37°C下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解。
    2. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中包含1×Fast Pace Ligation Buffer和1 μg φX174 RF I DNA,37°C下孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%。
    3. RNase活性:在1×Fast Pace Ligation Buffer中加入40 ng FAM-RNA,37°C下孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,条带无降解。
    4. 磷酸酶活性检测:在磷酸酶活性检测缓冲液中加入1×Fast Pace Ligation Buffer和2.5 mM对硝基苯磷酸,37°C下孵育4小时。经光谱测定法检测,405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。

    测序验证

    本品与Hieff NGS® End Repair/dA-Tailing Module(Cat#12608),2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12621)共同用于DNA文库构建,通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。


    运输与保存方法

    冰袋运输。

    -20℃保存,效期一年。


    注意事项

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法

    目前主流的合并法DNA建库试剂盒,其末端修复和加A处理后一般不纯化,直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容,进行接头连接。反应体系请参考如下配制,并涡旋混匀几秒钟,瞬离后至于20℃,反应15分钟即可。

    1 Adapter Ligation体系

    名称

    体积(μL)

    dA-tailed DNA

    60

    5×Fast-Pace Ligation Buffer

    20*

    Fast-Pace T4 DNA Ligase

    5

    DNA Adapter

    X**

    dd2O

    To 100

    【注】:*对于Ligation Enhancer,请上下颠倒、振荡,充分混匀并瞬时后离心使用。

    **根据自身需求加入适量的接头。


    相关产品

    建库试剂盒

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® MaxUp Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina®

    12301ES24/96

    24/96 T

    9756/32856

    Hieff NGS® MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®

    12200ES24/96

    24/96T

    6486/23567

    Hieff NGS® MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®

    12201ES24/96

    24/96T

    4626/16626

    Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®

    12203ES24/96

    24/96 T

    7486/28567

    Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®

    12206ES24/96

    24/96 T

    6155/23855

    文库构建磁珠

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® cfDNA Clean Beads100~200 bp

    12599ES08/56

    5/60 mL

    1666/9106

    Hieff NGS® Smarter DNA Clean beads (50 bp以上)

    12600ES08/56

    5/60 mL

    1386/7586

    Hieff NGS® DNA Selection BeadsSuperior AMPure XP alternative

    12601ES08/56

    5/60 mL

    986/6286

    Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit

    12603ES24/96

    24/96 T

    616/2266

    建库接头

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1

    12615ES04/16

    12×4/12×16 T

    1256/4536

    Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2

    12616ES04/16

    12×4/12×16 T

    1256/4536

    Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3

    12617ES04/16

    12×4/12×16 T

    1256/4536

    Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4

    12618ES04/16

    12×4/12×16 T

    1256/4536

    Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina®,(96 Index)

    12610ES96

    96 T

    1365

    建库模块

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module

    12607ES24/96

    24/96 T

    3263/10863

    Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module

    12608ES24/96

    24/96 T

    2066/6166

    2×Super Canace® High-Fidelity Mix for Library Amplification

    12621ES03/08

    1/5×1mL

    725/1855

    Hieff NGS® Dual-Mode cDNA Synthesis Kit

    12250ES24/96

    24/96 T

    4885/16485

    文库定量

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix

    12302ES05

    500 T

    1526

    Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard (1-6)

    12307ES09

    6×96 μL

    2126

    dsDNA HS Assay Kit for Qubit® 

    12640ES60/76

    100/500 T

    686/2696

    多重PCR

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff® Multiplex PCR Kit

    12279ES50/76

    100/500 T

    875/3165

    Hieff® Multiplex PCR Master Mix

    12280ES50/76

    50 /200 T

    875/3165

     

    HB190103