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RNAsafe Tissue Stabilizer RNAsafe动植物组织RNA稳定液
产品货号:10604ES60
产品规格:100 mL
产品价格:¥457
类别:RNA提取

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    RNAsafe Tissue Stabilizer  RNAsafe动植物组织RNA稳定液

    10604ES60

    100 mL

    457.00


    产品描述

    RNA酶广泛存在环境中,很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA,从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻,或者立即进行RNA的纯化,这给研究人员的户外工作带来诸多不便。

    RNAsafe动植物组织稳定液(RNAsafe Tissue Stabilizer)是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA,作为一种无毒溶液,可迅速渗入组织,灭活内源RNase。


    产品特点

    操作极其简便:只需要将新鲜组织切成合适大小(≤0.5cm)的组织块,浸入5~10倍体积的RNAsafe中即可。

    稳定周期长:RNAsafe浸润的组织/细胞可在37℃保存1天,室温保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃长期保存。

    下游兼容性广:几乎兼容于所有的RNA分离方法,如HieffTM Total RNA Extraction Reagent(货号10606ES60),以及几乎所有的商业化RNA抽提试剂盒,包括离心柱抽提法,磁珠纯化法等。

    材料应用性广:可用于多种动植物组织(如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等)的保存,还可用于酵母、组织培养细胞等。

    操作流程

    1. 样品处理

         A. 动物组织:RNAsafe稳定液不会破坏动物组织结构的完整性。

    处理过程:将组织切成合适大小后(≤0.5cm),然后加入5倍体积RNAsafe。

    注:已浸入RNAsafe的组织经平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块(≤0.5cm大小),再重新放回RNAsafe。

    注意:某些组织(如骨头)具有比较弱的液体渗透性,不适合用本品进行RNA保护。

         B. 植物组织:本品对于柔软的植物组织(如嫩叶,嫩茎)可直接渗透,且达到理想的RNA保护效果。

    处理过程:将组织切成合适的大小(≤0.5cm)后,加入5倍体积的RNAsafe稳定液。

    注:某些植物组织天生具有的屏障(如叶子表面的蜡层)可阻碍RNAsafe渗透,对于此类组织,往往需要破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。

         C. 组培细胞、白细胞等:按照标准实验操作收集细胞沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后加入5~10倍体积的RNAsafe。

         D. 酵母:离心弃上清,收集约108个细胞(12,000g,2min)。加入0.5~1ml RNAsafe。

    长期保存应置于RNAsafe中,4℃放置1小时。然后离心弃上清,收集酵母细胞(12,000g,5min),-80℃保存。

    2. 样品保存

         A. -80℃保存:样品结冻保存。对于归档的样本,建议-80℃保存。该保存条件下,样本可长期保存,保护效果最佳。

    操作过程:样本4℃浸透过夜,然后再转移至-80℃。

    如果中间需要做样本的融化,建议取出4℃浸透过夜的组织或离心收集细胞,然后再冻存于-80℃。RNAsafe保护后的样本抽提RNA时,可直接放在室温融化,之后重新冻上,不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。
    B. -20℃保存:同样适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃结冻,但可能会形成结晶。该保存条件下,样本可长期保存,不会对后续RNA分离造成影响。

    操作过程:样本4℃浸透过夜,然后再转移至-20℃。RNAsafe保护后的样本抽提RNA时,可直接放在室温融化,之后重新冻上,不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。

        C. 4℃保存:大部分样品放到RNAsafe中,可稳定保护1个月,不会有明显的RNA降解发生。

    D. 25℃(室温)保存:建议低温环境保存。若条件不允许,请将RNAsafe稳定液于冰上冷却几个小时,然后将样品浸入此溶液中,室温稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。

        E. 37℃保存:纯化的RNA样本于37℃孵育24h,结构依然完整。

    3. RNA提取

    RNAsafe灭活RNase的过程是可逆的,受保护的样本使用前务必不要清洗掉RNAsafe。

        A. 组织样本:用灭菌镊子从RNAsafe中取出组织块,然后用干净的吸水纸吸掉表面液体。之后立即置于裂解液中匀浆。

    B. 细胞样本:由于RNAsafe密度较大,此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说,保存在RNAsafe中的细胞能承受更高的转速,并维持细胞的完整性。大部分细胞可通过5,000g,5min离心收集沉淀。

    注意:由于不同细胞承受离心力会有差异,建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。

        C. 抽提RNA:按照RNA抽提Protocol进行即可。


    运输与保存方法

    室温运输,室温保存。

    注意事项
    1. 经RNAsafe处理的样本还可做基因组DNA的提取,甚至蛋白质的提取。但由于RNAsafe会变性蛋白质,因此不适合天然蛋白的提取。

    2. 本RNAsafe室温保存过程中可能会产生一些沉淀,在使用前只需放到37℃温育片刻,并间断摇晃重溶,不影响使用。
    3. 本RNAsafe仅适用于新鲜组织,不可用于冰冻组织。若需要保护冰冻组织内RNA的完整性,可使用我司的RNAsafe-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液(货号:10605ES60),即可将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态,并进行RNA抽提的过程中,维持RNA的稳定性。

    4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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