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400-6111-883
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Coelenterazine hcp 腔肠素hcp
产品货号:40910ES72
产品规格:1×250 μg
产品价格:¥2359
类别:活体成像试剂

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    Coelenterazine hcp 腔肠素hcp

    40910ES72

    1×250 μg

    -20℃避光保存

    2359.00


    背景描述

    腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480 nm。

    腔肠素作为水母发光蛋白复合物(Aequorin)的组成成分只有与钙离子(Ca2+)结合后,才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。其具有以下几个优点1)能检测较大范围的Ca2+浓度0.1-100 μM2)样品无自体荧光,背景荧光较低尽管信号较荧光钙离子指示剂弱,但信噪比更高,因此具有较高灵敏度3)Aequorin能够稳定维持在细胞内,能够进行数小时至数天Ca2+的监测。

    腔肠素具有能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET)的特性在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光能量转移到EYFP增强的黄色荧光蛋白,发出绿光(~530 nm)。通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系研究蛋白-蛋白之间的相互作用。BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量

    主要应用

    1. 活体成像。

    2. 报告基因检测。

    3. 检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平细胞和组织内的超氧阴离子过氧化亚硝基阴离子能够增强腔肠素在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光

    4. 高通量筛选

    5. 监测活细胞内钙离子水平


    产品描述

    腔肠素hcp(Coelenterazine hcp系天然腔肠素衍生物腔肠素hcp-水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍,其量子产量高,与Ca2+反应速度快,非常适合用于钙离子水平的检测。

    产品性质

    英文别名(English synonym)

    CLZN-hcp

    CAS号(CAS NO.)

    123437-32-1

    分子式(Formula)

    C25H25N3O2

    分子量(Molecular weight)

    399.48 g/mol

    溶解性(Solubility)

    可溶于甲醇和乙醇,不溶于DMSO

    外观(Apperance)

    黄色至橘色粉末

    纯度(Purity)(TLC

    ≥95%

    结构(Structure)

    image.png 


    运输和保存方法

    冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存,最好保存在惰性气体环境下,避免接触空气。

    腔肠素hcp工作液的配制

    腔肠素hcp溶解特性不溶于水。目前毒性最低的溶剂是100%乙醇,可配制浓度为0.1-1 mg/ml。加入pH低于7.0的酸性缓冲液(碱性pH会快速降解底物)稀释成低浓度工作液。切忌溶于DMSO。

    腔肠素hcp保存特性建议溶液现配现用!体外实验,需将稀释后的工作液室温放置20-30 min,方可稳定工作。该工作液可室温稳定放置3-4 h,有非常微弱的信号衰减发生。不建议储存液-20℃或更低温度保存,因为其高能量的二氧环丁酮结构即使在低温的情况下也会发生降解,导致荧光强度明显变弱。短时间保存条件:-70℃避光保存于塑料管内(溶液中不含有Ca2+),且有惰性气体保护。


    注意事项

    1. 粉末最好使用惰性气体(氮气或氩气),在
    密封良好的塑料管中避光保存于-20,长期保存于-70。管内即使存在少量空气,可能造成腔肠素n氧化失活,造成在不同试验间的量化分析结果无法比较。

    2. 本品接触空气,水或者任何氧化试剂会不稳定。

    3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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