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400-6111-883
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400-6111-883
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸
产品货号:40903ES01
产品规格:100 mg
产品价格:¥708
类别:活体成像试剂

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸

    40903ES01

    100 mg

    -20℃干燥避光保存

    708.00

    D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸

    40903ES02

    500 mg

    -20℃干燥避光保存

    2556.00

    D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸

    40903ES03

    1 g

    -20℃干燥避光保存

    3588.00


    产品描述

    D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

     

    image.png 

     

    D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析报告基因分析高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素钠盐,以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素(游离酸)水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。


    产品性质

    中文别名(Chinese synonym)

    D-萤火虫荧光素游离酸;

    英文别名(English synonym)

    S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid

    CAS号(CAS NO.)

    2591-17-5

    分子式(Formula)

    C11H8N2O3S2

    分子量(Molecular weight)

    280.33 g/mol

    外观(Appearance)

    类白色至浅黄色粉末

    溶解性(Solubility)

    本品难溶于水,加入稀碱促进其溶解。

    纯度(Purity)(HPLC)

    >99%


    运输和保存方法

    冰袋运输;-20干燥避光保存;有效期一年。

    使用方法

    1 体外生物发光检测

    1)用稀碱(如NaOH,KOH溶液)溶解D-荧光素,游离酸,配制成30 mg/mL的储存液(200×),并调整pH至7.4。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。

    如果有沉淀发生则需要调整pH至更高直至完全溶解。之后可以重新用酸性溶液来中和,调整至pH7.4

    2)用预热好的组织培养基1:200稀释储存液,配制工作液(终浓度150 µg/mL)。

    3)去除培养细胞的培养基直至无残留。

    4)待图像分析前,向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。

    2 活体成像分析

    1)用稀碱(如NaOH,KOH溶液)配制D-荧光素工作液(15 mg/mL),并调节pH至7.4,0.2µm 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

    2)注射量取决于注射方式,具体如下:

    注射方式

    剂量

    静脉注射(25-27gauge 针头)

    按 10 µL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液

    腹腔注射(25-27gauge 针头)

    按 10 µL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液

    肌肉注射(27gauge 针头)

    50 µL,浓度为1-2 mg/mL 荧光素工作液

    鼻内注射(pipette)

    50 µL,浓度为3 mg/mL 荧光素工作液

    3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

    【注】:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。


    注意事项

    1)本品(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-

    carboxylic acid,仅仅是不同公司在命名上的差异。

    2)本品保存和操作的过程中都要避光。另外储存液过滤除菌后,可以-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融。如果有条件,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长,长达1年。

    3)注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

    4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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