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强力Hieff® Robust PCR master mix——提升PCR成功率,大幅减少扩增时间

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研发背景

Hieff® Robust PCR Master Mix是一款高检出率型PCR预混液,通过酶结构的改造、筛选及Buffer的优化,解决了常规PCR Mix检出率低、产量低的问题。另外,延伸速度提升至15-30 s/kb,可用于基因的快速克隆。

产品描述

Hieff® Robust PCR Master Mix是预混PCR反应所需的各类组分的预混液,仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。因采用酶工程改造筛选的强力型Taq酶和高效扩增Buffer,该产品的扩增检出率大大提升,可解决绝大多数PCR反应。


产品特点

○ 扩增速度达15-30 s/kb,极限速度5 s/kb

○ 扩增长度1-4 kb

○ 模板适用性广

○ 靶基因GC耐受范围35-70%

产品数据

1.延伸速度30s/kb,极限延伸速度5s/kb

 

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图1:以小鼠基因组为模板,不同延伸速度(5 s/kb-60 s/kb)扩增2 kb大小的片段。PCR结束后取4 μL进行电泳检测。a为Hieff® Robust PCR Mix,b-d为其他品牌普通型PCR Mix,e为快速型PCR Mix。Marker:1 kb DNA ladder。

 

2.扩增长度4kb,扩增时间更短

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图2:以小鼠基因组为模板,分别扩增1-4 kb的目的片段,PCR反应条件使用各公司推荐的PCR反应条件,PCR反应结束后,取4 μL进行电泳检测。Marker:1 kb DNA ladder。

 

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3.适用于动植物基因组及菌落PCR实验

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图3:以人基因组DNA(1)、拟南芥基因组DNA(2)、水稻基因组DNA(3)、小鼠基因组DNA(4)、菌液(5)、质粒DNA(6)为模板,30s/kb延伸速度条件下分别扩增大小为0.5 kb、1 kb、2 kb、4 kb的片段,PCR结束后取4uL进行电泳检测。Marker:1kb DNA ladder。

产品应用

基因快速克隆、菌落PCR、TA克隆等。

FAQ

Q:产品保质期、运输问题

A:冰袋运输。-20℃,保质期2年。

Q:该产品扩增的PCR产物可用于PAGE胶电泳吗?

A:不可以。

Q:该产品可以用于扩增鼠尾、植物裂解液等粗制模板吗?

A:推荐10108 Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) 用于粗制模板的扩增。

Q:出现非特异性扩增的解决方案?

A:理论上,采用该产品的建议扩增条件,可以解决大部分基因扩增。当出现非特异性扩增时,可尝试将退火温度梯度上升2℃解决。

Protocol

以小鼠DNA扩增1kb基因举例说明:

体系配制

组分

体积

终浓度

ddH2O

to 50 μL

-

模板DNA

50 ng

-

Primer正向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

Primer反向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)

25 μL

 

反应程序

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

95℃

5 min

1

变性

95℃

10 sec

30

退火

55℃

20 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

终延伸

72℃

5 min

1

 

订购信息

产品名称

货号

规格

购买/试用

Hieff® Robust PCR Master Mix(With dye)

10106ES03

1 mL

65.00

10106ES08

5 mL

265.00

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货号

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价格(元)

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了解翊圣


上海翊圣生物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd.)成立于2009年,是一家致力于分子酶原料及其相关试剂盒研发、生产的高新技术型企业。公司总部设在上海国际医学园区,在全国(近)一线城市设有办事处和仓储物流,兼之健全的代理商体系,服务于全国各级科研单位、体外诊断和第三方检测机构、生物医药公司等2.5万家客户。

 

上海翊圣生物科技有限公司的主要研发人员来自国内一线科研院所:如中科院、上海交大、武汉大学、华东师范大学、厦门大学、上海师范大学和南京农业大学等。翊圣聘请组建了顶级的技术顾问团队,成员来自国内外一流大学,如耶鲁大学,加州伯克利、中科院大学等等,拥有丰富的科研经验以及外企工作的经历。优秀的人才是翊圣产品的品质保证,优秀的人才是翊圣的未来。