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HB200401

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

10303.jpg


产品信息


产品名称

产品编号

规格

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

10303ES60

100 U

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

10303ES76

500 U

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile 热敏UDG

10303ES96

10000 U


产品描述


热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。


产品组分


编号

组分

10303ES60

(100 U)

10303ES76

(500 U)

10303ES92 (10000 U)

10303-A

Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL)

100 μL

500 μL

10 mL


产品应用


1. 去除含dU的PCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。


酶活定义


以25℃,30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。


失活方式


50℃,10 min。


运输储存方法


干冰运输。-20℃保存,有效期一年。


注意事项


1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。


质量控制


核酸内外切酶残留检测:10 U的本酶和0.6 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育16 h,DNA的电泳谱带不发生变化。


RNase残留检测:10 U的本酶和1 μg HeLa细胞总RNA在37℃下孵育1 h,RNA的电泳谱带不发生变化。

大肠杆菌DNA残留检测:10 U本品经E.coli 16s rDNA特异性的TaqMan qPCR检测,E.coli基因组残留低于10拷贝。

酶失活检测:10 U本品经50℃处理10 min,与1 μg含dU的dsDNA模板温育30 min,DNA的电泳谱带不发生变化。


应用实例


1. 按下列体系配制PCR反应液:

组分

体积μL

终浓度

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dUTP (10 mM)

0.6 mM

dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)

0.2 mM each

模板DNA

Optional

-

引物1 (10 μM)

2

0.4 μM

引物2 (10 μM)

2

0.4 μM

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5

0.05 U/μL

Heat-Labile UDG (1 U/μL)

1

1 U/50 μL

ddH2O

Up to 50


注:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

94℃

2 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

注:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。


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产品名称

货号

规格

价格(元)

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1mL

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25mL

面议

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200KU

7796.00

HB200331