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产品名称: Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双荧光素酶报告基因检测试剂盒
  • 产品货号:11402ES60
  • 产品规格:100次
  • 产品价格:
  • 类别:报告基因相关
   
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    价格(元)

    促销价

    Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双荧光素酶报告基因检测试剂盒

    11402ES60

    100

    -20℃避光

    1265.00

    955.00

    11402ES80

    1000

    -20℃避光

    9965.00

    7475.00

    产品描述

    萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)大小为61 KDa,单亚基蛋白,能够催化荧光素(luciferin)氧化,生成氧化荧光素oxyluciferin;海肾荧光素酶(Renilla luciferase)为36 KDa的单亚基蛋白,能够催化腔肠素(coelenterazine)氧化形成coelenteramide。二者在翻译后均无需修饰即可发挥作用。

    翊圣生物生产的Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双荧光素酶报告基因检测试剂盒首先以荧光素为底物来检测萤火虫荧光素酶报告基因的活性,之后在淬灭该荧光反应的同时,以腔肠素为底物检测海肾荧光素酶报告基因的活性。其检测机理机理如图所示:

    萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560 nm。海肾萤光素酶催化coelenterazine发光的最强发光波长为465 nm

    通常将目的基因的5UTR或者启动子克隆至Firefly Luciferase的上游,或者3UTR克隆至Firefly Luciferase的下游,通过检测萤火虫荧光素酶的量来检测启动子或者调控原件的转录调控作用。Renilla Luciferase作为内参,来消除细胞数量或者转染效率的差异。

    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    11402ES60100次)

    11402ES801000次)

    11402-A

    细胞裂解液

    60 mL

    60 mL×10

    11402-B

    萤火虫荧光素酶缓冲液

    10 mL

    10 mL×10

    11402-C

    萤火虫荧光素酶底物(50 X

    200 μL

    200 μL×10

    11402-D

    海肾荧光素酶缓冲液

    10 mL

    10 mL×10

    11402-E

    海肾荧光素酶底物(50 X

    200 μL

    200 μL×10

    运输及保存方式

    冰袋运输。

    产品-20℃保存12个月。长期保存推荐-80℃。

    萤火虫荧光素酶反应工作液和海肾荧光素酶反应工作液现配现用。

     

    实验步骤

    1:裂解细胞

    1)将细胞裂解液充分混匀,按如下方式加入细胞裂解液,充分裂解细胞。

    a: 对于贴壁细胞,吸尽细胞培养液,按照下表比例加入细胞裂解液,轻轻旋转培养皿或者培养板使裂解液完全覆盖细胞,

    b: 对于悬浮细胞,离心弃去上清,按照下表比例加入裂解液,   

       

    96孔板

    48孔板

    24孔板

    12孔板

    6孔板

    100 μL

    150 μL

    200 μL

    300 μL

    500 μL

    冰上孵育5 min,充分裂解细胞。

    2)(选作)10000-16000转离心1 min,取上清。

    2:荧光检测

    1)取20 μL细胞裂解液,加至黑色酶标板中。按照实验需要,可设置3-5孔重复。

    2)配置萤火虫荧光素酶反应工作液和海肾荧光素酶反应液,即萤火虫荧光素酶底物(50 X)和海肾荧光素酶底物(50 X)分别用对应的缓冲液稀释至1 X 工作液。并孵育至室温。

    3)加入100 μL 萤火虫荧光素酶反应液,震板混匀,检测萤火虫荧光素酶的活力,检测尽量在30 min内完成。

    4)加入100 μL 海肾荧光素酶反应液,震板混匀,检测海肾荧光素酶的活力,检测尽量在30 min内完成。

    5)分析数据。

    操作流程如下:

     

    注意事项

    1)检测过程中需自备耗材和设备包括如下:PBS100 μL移液器或者排枪;黑色酶标板;Luminometer发光计或者多功能酶标仪或者其他能够检测生物发光的仪器。

    2)关于检测仪器的选择:能够检测化学发光或者生物发光的仪器都可适用于此试剂盒。如果使用多功能酶标仪,为防止各孔之间的干扰,我们推荐使用黑色酶标板,并且不同实验组之间最好有间隔。

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    产品名称

    产品编码

    规格

    价格(元)

    Luciferase Reporter Plasmid negative control荧光素酶报告基因质粒阴性对照

    11555ES03

    1 μg

    1685.00

    pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control

    pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照

    11556ES03

    1 μg

    1685.00

    pGMLR-TK luciferase reporterpGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒)

    11557ES03

    1 μg

    1685.00

    pGMLR-CMV Luciferase Reporter PlasmidpGMLR-CMV海肾荧光素酶报告基因质粒)

    11558ES03

    1 μg

    1685.00

    Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒

    11401ES60/76/80

    100/500/

    1000

    349/969/1748

     

    萤火虫荧光素酶报告基因质粒

    NF-κB

    STAT3

    STAT1

    SREBP

    SP1

    Sox2

    RAR

    RBP-JK

    PPARγ

    NFAT

    Nanog

    MTF1

    MEF2

    LXR

    KLF4

    ISRE

    IRF1

    HIF-1

    HSF

    HNF4

    GRE

    GLI

    GATA

    GAS

    FOXO

    EGR1

    CREB

    c-Jun

    C/EBPα

    ATF6

    AARE

    AP-1

    AR

    AhR

    Oct4

    Pax6

    p53

    GAL4

    TCF/LEF1

    SMAD

    Myc

    SRE

    E2F

    ERSE

    ARE

    PU.1

    Rb

    AFP1

    AP3

    AREB6

    ATF1

    BMP

    C/EBPβ

    C-REL

    DBP

    Elk1

    ERRα

    ERRβ

    ERRE

    FXR

    GCNF

    HNF1

    LXRE

    MEF1

    MEF3

    PPAR

    RORα2

    RORβ

    RORE

    RXR

    SRF

    STAT4

    YY1

    GLI3

    STAT6

    SRE

    VDR

    PR

    ER

    IL6-promoter

    TNF-α-promoter

    AAT-promoter

    STAT5

    MR

    NRSF

     

    报告基因慢病毒颗粒

    NF-κB

    VDR

    STAT3

    STAT1

    SREBP

    SP1

    Sox2

    RAR

    RBP-JK

    PR

    PPARγ

    NFAT

    Nanog

    MTF1

    MEF2

    LXR

    KLF4

    ISRE

    IRF1

    HIF-1

    HSF

    HNF4

    GATA

    GAS

    FOXO

    GRE

    GLI

    c-Jun

    C/EBPα

    ATF6

    EGR1

    CREB

    AR

    AhR

    Oct4

    AARE

    AP-1

    GAL4

    TCF/LEF1

    SMAD

    Pax6

    p53

    E2F

    ERSE

    ARE

    Myc

    SRE

    AFP1

    AP3

    AREB6

    PU.1

    Rb

    C/EBPβ

    C-REL

    DBP

    ATF1

    BMP

    ERRβ

    ERRE

    FXR

    Elk1

    ERRα

    LXRE

    MEF1

    MEF3

    GCNF

    HNF1

    PPAR

    RORα

    RORβ

    MR

    NRSF

    SRF

    STAT4

    YY1

    RORE

    RXR

     

     

     

     

    GFP报告基因质粒

    NF-κB

    VDR

    STAT3

    STAT1

    SREBP

    SP1

    Sox2

    RAR

    RBP-JK

     PR

    PPARγ

    NFAT

    Nanog

    MTF1

    MEF2

    LXR

    KLF4

    GATA

    GAS

    FOXO

    HSF

    HNF4

    c-Jun

    C/EBPα

    ATF6

    GRE

    GLI

    AR

    AhR

    Oct4

    EGR1

    CREB

    GAL4

    TCF/LEF1

    SMAD

    AARE

    AP-1

    E2F

    ERSE

    ARE

    Pax6

    p53

    AFP1

    AP3

    AREB6

    Myc

    SRE

    C/EBPβ

    C-REL

    DBP

    PU.1

    Rb

    ERRβ

    ERRE

    FXR

    ATF1

    BMP

    LXRE

    MEF1

    MEF3

    Elk1

    ERRα

    PPAR

    RORα

    RORβ

    GCNF

    HNF1

    SRF

    STAT4

    YY1

    MR

    NRSF

    SRE

    RORE

    RXR

    GLI3

    STAT6

     

     

     

     

     

     

    HB180118