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    Hieff Trans™脂质体转染试剂,让您对转染自信满满

——效率高不高,一转便知道 

关键词:liposomal ; transfection ; lipo2000 ; lipo3000

转染效率低,细胞毒性大,操作步骤太繁琐?怎么办?

你需要有一种超能力的转染试剂来成就你的转染实验

转染能够让我们更好的研究目的基因是如何在细胞中进行表达和调控。目前常见的转染方法有:磷酸钙共沉淀法、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、机械法(如显微注射和基因枪法)、阳离子脂质体试剂,其中阳离子脂质体试剂转染是目前最常用的转染方法。

Hieff TransTM脂质体核酸转染试剂作为一款阳离子脂质体转染试剂,与应用最为广泛的Lipo2000相比具有更高的转化效率和更加便捷的操作。目前已经在多种细胞系中得以验证,如常见的细胞系293THelaMCF-7以及相对应用比较少的Raw264.7COS-7Hep3B等细胞。其中常见细胞系的转染效率达90%以上,远远可以满足我们对于转染实验的需求。

作用原理

阳离子能够通过表面所带正电荷的静电作用将核酸包裹,形成核酸-脂质体复合体。细胞膜表面带负电荷,能够将该复合体吸附,被吸附后的复合体能够通过膜的融合作用或者细胞内吞的方式形成包涵体进入细胞。有小部分的DNA 能够从包涵体中被释放,并进入细胞质中,再进一步进入细胞核内转录、表达。

 

1:脂质体介导的转染和内吞过程

产品特点:

高效性: 可对大多数真核细胞进行转染,并且对于常见细胞系转染效率达90%以上。

低毒性:转染细胞形态良好并产生大量的转染基因蛋白

操作简便:可以直接将脂质体复合物加入到含血清的培养基中。

多样性:适合瞬时转染和稳定转染。

操作流程:

 

2:细胞转染实验流程

产品数据:

客户提供部分细胞系转染数据(仅供参考)

细胞

培养板

细胞密度

DNA

Hieff Trans

效率

293T

6

80%

g

l

90%

293FT

24

85%

g

l

90%

Hela

12

90%

0.2μg

0.6μl

90%

Raw264.7

35mm

80%

g

l

90%

Hek293

6

95%

g

10μl

80-90%

NCI-H1975

6

80%

g

10μl

80%

3t3

12

90%

1μg

l

50%

 

验证过的细胞系

293T

293FT

HEK293

HEK 293T 

Caco2

COS-7

DF-1

Lenti X-293T

HeLa

HepG2

LM3

MCF-7

MDA-MB-231

MEF

NCI-H1975

NIH-3T3

PC12

Raw264.7

Vero

H9c2

Hepa1-6

MCF10A

CHO

5-8F

BV-2

A549

3t3

H520

HUVEC

C6

HaCaT

N2A

SGC-7901

H9

MKN-28

Hep 3B 

SMCC7721

RKO

C2C12

More

客户反馈结果展示

 

 

 

Hieff TransTM Liposomal 转染应用

 

 

细菌蛋白激活细胞自噬体形成

细胞:Hela   转染质粒:细菌效应蛋白A   LC3II:自噬体标记蛋白

细胞分裂纺锤体结构

细胞Hela   转染质粒:Flag-tubulin   细胞核染色:Hoechst33342

 

 

DNA转染

 

DNA转染

 

 

 

 

 

Hieff Trans

Lipo3000

 

Hieff Trans

Lipo2000

图片来源:复旦大学 细胞系:Hek293 核酸类型:DNA

 

图片来源:长春应化所 细胞系:Hela 核酸类型:DNA

 价格比较:

 

单次反应各公司价格对比

常见问题:

Q1:配制核酸转染试剂复合物时能否有血清的存在?

答:血清的存在会影响脂质体的形成,建议配制核酸转染试剂复合物时采用无血清培养基(一般推荐MEM培养基)。

Q2:转染实验过程中是否需要更换成无血清培养基?

答:不需要,我们的转染试剂可以在含血清的介质中进行转染的过程。

Q3:转染后需要进行终止吗?

答:不需要脂质体复合物可以稳定存在6个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液,为了保证细胞正常生长所需的营养,需要在46小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液则在脂质体转染后不需要进行再次换液

Q4:转染试剂的保存及使用过程中的注意事项?

答:本试剂一定要4℃保存,要注意避免反复多次长时间开盖,长时间开盖会导致脂质体氧化而影响转染效率。

Q5:若想提高转染效率,应该注意什么?

答:a:转染时细胞的密度,90%-95%

b:转染时,核酸和脂质体稀释液要用MEM无血清培养基。

c:转染后4-6h可选择换液。

参考文献:

Su D N, Wu S P, Chen H T, et al. HOTAIR, a long non-coding RNA driver of malignancy whose expression is activated by FOXC1, negatively regulates miRNA-1 in hepatocellular carcinoma[J]. Oncology Letters, 2016, 12(5):4061.

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规格

价格(元)

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

40802ES02

0.5 mL

738.00

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

40802ES03

1.0 mL

1308.00

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