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    多样本直接PCR系列专题

More Genotyping, Less Time and Fewer Reagents

  PCR-based Genotyping等实验,常需纯化样本基因组。当待测样本较多时,纯化基因组的过程费时、操作重复,并且实验成本高。翊圣生物通过改造Taq DNA聚合酶,优化PCR反应体系开发出无需基因组纯化的Direct PCR Kit系列产品。

Clever PCRDirect PCR

翊圣Direct PCR Kit是直接从样本开始,以未经基因组纯化的微量原始样本(图1-A)或其裂解产物(图1-B)作为模板,进行PCR-based Genotyping(见图1)。与常规PCR-based Genotyping相比,Direct PCR Kit样本用量少,操作简单,实验成本低,可高通量化样本检测。

 

1 Direct PCR技术 A. 直接法:取少量样本直接加入到PCR Master Mix中,进行PCR鉴定。B. 裂解法:样本取样后,加入裂解液中,裂解释放基因组,取少量裂解上清液加入到PCR Master Mix中,进行PCR鉴定。

技术优势

★直接:无需进行费时而昂贵的DNA纯化

★快速:10min完成模板制备,最少50min完成PCR反应

★简便:样品无需剪碎或研磨即可完成裂解

        PCR Mix为预混液形式,减少加样步骤

★节省:材料用量少

★高通量:可在96孔板中完成裂解反应

翊圣生物Direct PCR Kit

产品参数

Animal Tissue Direct PCR Kit

Mouse Tissue Direct PCR Kit

Plant Tissue Direct PCR kit

Animal Blood Dicrect PCR Kit

适用生物

小鼠、兔子、鸟类、淡水鱼果蝇线虫

小鼠、大鼠

水稻、玉米、烟草、油菜、小麦、大豆等

人血、鼠血、鸡血、鸟血、牛血、狗血

适用组织/材料类型

脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、羽毛末端

鼠尾、鼠耳、脚趾(带肌肉)和其他脏器

嫩叶老叶、幼苗嫩茎

EDTAHeparin抗凝全血、血液的采集卡、冷冻血和抗凝血等

样品使用量

5-10mg

5-10mg

3-5mg5-7mm1-2mg2-3mm

人血2-45%;鼠血2-20%;采集卡1-4mm

基因组释放时间

10-30min

10-30min

10min或无需专门裂解过程

无需专门裂解过程

PCR产物最适长度

1kb

PCR产物是否加A

裂解反应体系加A效率不定

50µL体系,裂解产物使用量

0.5-5µL

0.5-5µL

5-10µL

人血2-45%;鼠血2-20%;采集卡1-4mm

应用

转基因鉴定基因分型等

转基因鉴定基因分型等

转基因鉴定基因分型等

基因型病原微生物鉴定

Direct PCR Kit实验过程

本系列产品运用独特的蛋白酶裂解体系裂解样品,裂解液可直接作为模板,搭配试剂盒中的PCR Master Mix进行基因扩增。

 

2 动物、小鼠组织直接PCR实验过程

 

3 动物全血直接PCR实验过程

 

4 植物组织直接PCR实验过程

产品优势

Ø 改造的Taq DNA PolymeraseDirect PCR的保证:超强的抑制物耐受性

对于非纯化样本作为模板时,会引入很多对PCR反应有抑制的成分。以普通的PCR反应体系和Taq DNA聚合酶较难得到理想的结果,甚至无法进行PCR扩增。本系列试剂盒中PCR Mix为配方优化预混液,采用改造的Taq DNA Polymerase,增加与模板DNA结合能力,对于常见PCR抑制剂具有更高的耐受性,因此具有更广泛的模板适应性。

 

5 直接PCR Kit中的PCR Mix具有更高的杂质耐受度。相同模板量,用不同的PCR Mix进行PCR,同时在体系中加入不同浓度的各种PCR反应抑制物。比较不同条件下的PCR产物量。

 翊圣生物针对不同样本开发出一系列产品

多动物通用型Animal Tissue Direct PCR Kit

Ø 最快速:操作时间短

 

6 翊圣动物组织直接PCR试剂盒更加节省时间。

Ø 
实验例:基因敲除小鼠基因型鉴定

 

 

7 动物组织直接PCR试剂盒检测基因敲除动物组织直扩结果。M100bp DNA ladder1-8:以裂解产物为模板。+:以50ng纯化基因组DNA为模板。:以去离子水为模板。循环数35个循环。单条带(580bp:敲除动物纯合子基因组。单条带(180bp:野生型基因组。两条带(580bp/180bp:敲除动物杂合子基因组。

二、啮齿类专用型:Mouse Tissue Direct PCR Kit

Ø 更快速:基因释放充分


 

 

  

 

8 小鼠组织直接PCR试剂盒不同裂解时间直扩结果。M100bp DNA ladder+:以50 ng纯化基因组DNA为模板。循环数35个循环。 

 

Ø 更彻底:基因释放充分


1优于常规碱裂解方法

 

 

 

9 鼠尾经不同裂解方式处理后,直扩结果。检测基因SOX21M100 bp DNA ladder1-2:以常规碱裂解方式处理裂解产物为模板。3-4:以小鼠组织直接PCR试剂盒裂解产物为模板。+:以50 ng纯化基因组DNA为模板。:以去离子水为模板。循环数35个循环。


2、媲美同类产品

 

 

 

10 鼠尾经不同品牌同类产品裂解处理后,直扩结果。检测基因:SOX21M 100 bp DNA ladder+ :以50 ng纯化基因组DNA为模板。循环数:35个循环。

 

三、多动物通用型:Animal Blood Direct PCR Kit

Ø 最大模板耐受度:高达45%

 

11 不同体积的EDTA抗凝人血加入量,动物血液直接PCR试剂盒直扩结果。检测基因SOX2MDNA Marker I循环数30个循环。

 

四、植物类专用型:Plant Tissue Direct PCR Kit

Ø 多类型植物样本验证

 

12 不同类型植物叶片直扩结果。M100 bp DNA ladderC:相应植物纯化基因组DNA为模板。1-2:叶片组织裂解产物为模板。循环数30个循环。

客户实验

1、转基因小鼠基因型鉴定


 

13青岛大学用户使用鼠尾直接PCR试剂盒扩增某基因结果。MDNA marker II1-12:转基因小鼠鼠尾裂解液。13:阳性质粒对照。:以去离子水为模板。循环数30个循环。

2、水稻基因直扩

 

14 华中农业大学用户使用植物直接PCR试剂盒扩增水稻相关基因

订购信息

产品货号

产品名称

规格

价格(元)

10180ES50

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒

50 T

326.00

10180ES70

200 T

1236.00

10181ES50

Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠组织直接PCR试剂盒

50 T

326.00

10181ES70

200 T

1236.00

10182ES50

Animal Blood Direct PCR Kit 全血直接PCR试剂盒

50 T

326.00

10182ES70

200 T

1236.00

10183ES50

Plant Tissue PCR Kit 植物组织直接PCR试剂盒

50 T

326.00

10183ES70

200 T

1236.00