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产品名称: 2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)
  • 产品货号:10108ES03
  • 产品规格:1 mL
  • 产品价格:
  • 类别:常规PCR
   
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    产品名称

    产品编号

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    价格(元)

    2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)

    10108ES03

    1 mL

    -20℃

    75.00

    2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)

    10108ES08

    5×1 mL

    -20℃

    345.00

    产品描述

    2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有HieffTM HotStart Taq DNA PolymerasedNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,可以高通量操作并提高实验结果的重现性。HieffTM HotStart Taq DNA Polymerase经过配体修饰的热稳定 Taq DNA Polymerase,该配体可以随温度变化来调节 DNA 聚合酶活性。在室温下酶活性被完全封闭,经 95℃加热后活性才被释放。HieffTM HotStart DNA Polymerase 的激活时间只需要 2-3 min,兼容现有的 PCR 程序。本产品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增,可以有效地进行基因分型实验

    产品应用

    本产品主要应用于小鼠基因型鉴定。

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII37℃下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

    运输与保存方法

    冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。

    注意事项

    为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     


    PCR反应体系(50 μL

    组分

    体积

    终浓度

    ddH2O

    to 50 μL

    -

    模板DNA

    适量

    -

    Primer正向 (10 μM)

    2 μL

    0.4 μM

    Primer反向 (10 μM)

    2 μL

    0.4 μM

    2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)

    25 μL

    1×

    【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。

    模板种类

    模板使用量

    基因组DNA

    50 ng-100 ng

    质粒DNA

    100 pg-20 ng

    cDNA

    1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

    PCR扩增程序

    循环步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    95

    5 min

    1

    变性

    95℃

    30 sec

    35

    退火

    50-60℃

    30 sec

    延伸

    72℃

    30 sec/kb

    终延伸

    72

    10 min

    1

    【注】:1退火温度和时间:退火温度推荐使用50-60℃。退火时间推荐设置为30 sec,可以在20-30 sec内调节。可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。

    2延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30-60 sec/kb

    3扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。

    HB180914