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产品名称: 5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
  • 产品货号:10137ES03
  • 产品规格:1 mL
  • 产品价格:
  • 类别:常规PCR
   
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    产品编号
    规格
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    价格(元)
    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
    10137ES03
    1 mL
    -20℃
    1215.00
    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
    10137ES08
    5×1 mL
    -20℃
    3065.00
    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
    10137ES25
    25×1 mL
    -20℃
    11165.00
    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
    10137ES76
    500 mL
    -20℃
    178655.00

    产品描述

    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)是基于新一代高保真DNA聚合酶Canace开发的,针对于高通量测序领域中多重PCR文库构建应用专门优化的Canace酶基于Pyrococcus furiosis DNA Polymerase,经基因工程改造而成。其蛋白结构包含5’→3’聚合酶结构域和经过改造的3’→5’外切酶结构域。这种组合大幅度提升了酶的耐热性,保真性。耐热温度达到98℃,保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,普通Pfu DNA聚合酶的6倍。酶溶液中添加了独特的延伸因子,扩增速度达到15 sec/kb。本产品为5×mix PCR混合液可添加的模板、引物体积范围更大,使您的实验更加灵活(本公司另有2×mix可供选择,Cat.10138)

    产品组分
    组分
    产品编码/规格
    10137ES03
    10137ES08
    10137ES76
    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
    1 mL
    5×1 mL
    25×1 mL
    500 mL
    产品应用
    多重PCR文库构建。
    质量控制
    核酸外切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA -HindIII,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
    核酸内切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入2 U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
    运输与保存方法
    冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。
    注意事项
    1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
    2. 值得注意的是,多重PCR建库实验本身具有一定的难度,通常需要进行优化,如您在使用本产品时遇到困难,可联系我们的技术支持,我们有多重优化方案,可帮助您更好的构建实验体系。

    PCR反应体系(推荐冰上配制)

    组分
    体积 μL
    ddH2O
    to 50
    DNA模板
    X
    Primer mix (X μM)
    X
    5× Hieff CanaceTM PCR Master Mix (for Multiplex PCR)
    10
    【注】:1) 试剂使用:使用前要充分解冻混匀。
    2) 引物与模板NGS建库领域中通过多重PCR进行target enrichment,其中的引物和模板条件需要自行摸索
    3) 高GC模板:在体系中加入终浓度为5%的DMSO可有利于扩增GC含量大于60%的模板
    PCR扩增程序
    温度
    时间
    循环数
    预变性
    0.5-3 min
    1
    变性
    98℃
    25-35(可自行优化)
    退火
    60℃
    20 sec
    延伸
    15-30 sec/kb
    终延伸
    72℃
    5 min
    1
    【注】1) 预变性温度和时间:推荐使用98℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
    2) 退火温度和时间:推荐使用60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
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    促销价(元)
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    HB180709