7×24小时 服务热线:400-6111-883  翊圣微信:
产品名称: 2×Hieff™ HotStart PCR Master Mix (No Dye)
  • 产品货号:10112ES03
  • 产品规格:1ml
  • 产品价格:
  • 类别:常规PCR
   
  • 产品简介
  • 实验数据
  • 文档资料
  • 相关产品
  • 论文发表
  • 产品信息

    产品名称          

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    2×HieffTM HotStart PCR Master MixNo dye

    10112ES03

    1ml

    -20 ºC

    96.00

    2×HieffTM HotStart PCR Master MixNo dye

    10112ES08

    5×1ml

    -20 ºC

    432.00

    产品描述

    2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix (No Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有UNICONTM HotStart Taq DNA PolymerasedNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。UNICONTM HotStart Taq DNA PolymeraseUNICONTM Taq抗体和HieffTM Taq DNA Polymerase的混合产品。UNICONTM Taq抗体与HieffTM Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30 min,依旧可以封闭HieffTM Taq DNA Polymerase的活性。UNICONTM HotStart Taq DNA Polymerase预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。预混液中不含染料。

    产品应用

    低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII37℃下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

    运输与保存方法

    冰袋运输。-20 ºC保存。

    注意事项

    为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

     

    PCR反应体系(50 μL

    组分

    体积

    终浓度

    ddH2O

    to 50 μL

    -

    模板DNA

    适量

    -

    引物正向(10 μM)

    2 μL

    0.4 μM

    引物反向(10 μM)

    2 μL

    0.4 μM

    2×UNICONTM HotStart PCR Master MixNo Dye

    25 μL

    1×

    【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。

    模板种类

    模板使用量

    基因组DNA

    50 ng-200 ng

    质粒DNA

    100 pg-20 ng

    cDNA

    1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

    PCR扩增程序

    循环步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    95℃

    5 min

    1

    变性

    95

    30 sec

    35

    退火

    50-60

    30 sec

    延伸

    72

    30 sec/kb

    终延伸

    72

    10 min

    1

    【注】:1) 退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。

    2) 延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb

    3) 扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。

    相关产品

    产品名称

    产品货号

    规格

    价格()

    2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye)

    10102ES03

    1 mL

    40.00

    10102ES08

    5×1 mL

    150.00

    Hieff CanaceTM High-Fidelity DNA Polymerase

    10135ES60

    100 U

    626.00

    10135ES76

    500 U

    2356.00

    10135ES80

    1000 U

    4256.00

    YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)

    10202ES76

    500 μL

    448.00

    Agarose琼脂糖

    10208ES60

    100 g

    219.00

    10208ES80

    10×100 g

    1869.00

    10208ES92

    100×100 g

    16899.00

    6×DNA loading buffer

    10213ES08

    5×1 mL

    40.00

    dNTP Mix (10 mM each)

    10124ES76

    500 μL

    76.00

    10124ES78

    1 mL

    136.00

    HB170522