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产品名称: Hieff™ Long Taq DNA Polymerase长片段DNA聚合酶
  • 产品货号:10107ES62
  • 产品规格:125U
  • 产品价格:
  • 类别:常规PCR
   
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    产品编号

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    价格(元)

    HieffTM Long Taq DNA Polymerase 长片段DNA聚合酶

    10107ES62

    125 U

    -20 ºC

    155.00

    HieffTM Long Taq DNA Polymerase 长片段DNA聚合酶

    10107ES78

    5×125 U

    -20 ºC

    735.00

    产品描述

    HieffTM Long Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase与一种含有3’ →5’外切酶活性的蛋白组成的混合酶,其保真性是Taq DNA Polymerase6倍,专门用于长片段的扩增。独特的缓冲体系使HieffTM Long Taq DNA Polymerase可扩增长达8 kb的人基因组片段和10 kb左右的质粒模板PCR扩增产物的3’端带A,可直接用于TA克隆。

    产品组分

    编号

    组分

    产品编号/规格

    125 U

    10107ES785×125 U

    10107-A

    HieffTM Long Taq DNA Polymerase(5 U/μL)

    25 μL

    5×25 μL

    10107-B

    HieffTM Long Taq Buffer  (Mg2+,dNTPs)

    4×1 mL

    20×1 mL

    活性定义

    用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃, 30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA -HindIII37℃下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    核酸内切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入2 U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

    运输与保存方法

    冰袋运输。-20ºC保存,有效期1年。

    注意事项

    为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

    PCR反应体系(推荐冰上配制

    组分

    体积

    终浓度

    ddH2O

    to 50 μL

    -

    HieffTM Long Taq Buffer  (Mg2+,dNTPs)

    25 μL

    DNA模板 

    适量

     

    Primer正向 (10 μM)

    2.5 μL

    0.5 μM

    Primer反向 (10 μM)

    2.5 μL

    0.5 μM

    HieffTM Long Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

    0.2 μL

    1 U/50 μL

    【注】: 1) 试剂使用:使用前要充分融化混匀。

    2) 聚合酶浓度:推荐使用1 U/50 μL。可以在0.5-2 U/50 μL之间进行优化,请勿超过2 U/50 μL

    3Mg2+终浓度体系终浓度为1.5 mM。如有特殊需要,可用50 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

    4) 不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系)

    模板种类

    用量

    动植物基因组DNA

    100-500 ng

    大肠杆菌基因组DNA

    10-100 ng

    λDNA质粒DNA

    0.01-1 ng

    PCR扩增程序

    循环步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    95℃

    5 min

    1

    变性

    95℃

    30 sec

    30-35

    退火

    55℃

    30 sec

    延伸

    72℃

    30 sec/kb

    终延伸

    72℃

    7 min

    1

    :退火温度需要根据引物退火温度调整,一般设置成低于引物退火温度1-2℃即可。

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