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    Hieff™ Quick exosome isolation kit(for Cell Culture Media) 细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒

 产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格

HieffTM Quick exosome isolation kitfor Cell Culture Media

细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒

41201ES25

25 mL

室温

2155.00

41201ES50

50 mL

室温

3855.00

产品描述

       Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNARNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。

本试剂盒采用独特的分离技术,可以快速从细胞培养上清中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

41201ES25

41201ES50

41201-A

Exosome isolation solution( Cell Culture Media

25 mL

50 mL

运输和保存方法

室温运输,本试剂盒可于室温稳定保存24个月。

注意事项

1)为了确保获得的外泌体是来自于您的细胞,最好使用无外泌体的血清进行培养。

2)如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

3)产品只针对细胞培养上清来源的外泌体分离,不适用血清/血浆中外泌体的抽提,如果需要进行血清/血浆的外泌体分离,请选用血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

样品制备:

收集细胞培养基至15 mL离心管中,3000×g,离心10 min;小心收集上清,并转移至新的离心管中(勿破坏沉淀),于冰上放置待用。

【注】若收集的细胞上清不能及时使用,可先放置于-20℃-80℃冷冻。使用时,于25℃水浴锅中解冻,完全溶解后置于冰上待用。

 外泌体分离:

1)试剂准备:使用前请将外泌体抽提试剂充分混匀。

2)上清预处理:吸取10 mL的细胞培养上清,加入2.5 mL外泌体抽提试剂(41201-A),涡旋振荡混匀1 min,再放置于2℃8℃静置2h

细胞培养上清

外泌体抽提试剂

用途

10 mL

2.5 mL

电镜、NTA粒径、Western Blot

40 mL

15 mL

多基因核酸分析(qPCR)、测序

【注】上述用量的推荐,仅针对外泌体分泌量高的肿瘤细胞,对于外泌体分泌量少的样品(例如干细胞)可以适当加大上清的用量。其它规格的细胞上清可以根据外泌体抽提试剂的用量进行等比例换算。

3)外泌体沉淀:取出装有混合液的离心管于4℃10000×g离心60 min,弃上清,收集沉淀(尽可能吸尽上清)。

4)外泌体重悬:取100 μL 1×PBS均匀吹打离心沉淀物,使其充分混匀,并转移至新的1.5 mL离心管中;

5)外泌体的获得:将含有外泌体的1.5mL离心管于4℃12000×g离心2 min,弃沉淀,保留上清液。

6)外泌体的保存:纯化后的外泌体可于4℃保存3天,-80℃ 长期保存,避免反复冻融。

外泌体浓缩(可选):

如果获得的外泌体浓度比较低,可以使用密理博3kD孔径的超滤管于4℃14000×g离心10-30 min,内管中即为纯化后的外泌体颗粒。

外泌体除菌(可选):

获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。

结果展示:

NTA粒径检测:结果显示通过Yeasen外泌体抽提获得的外泌体分散性好,大小均一,峰形单一。

表面标志物分析:通过Western Blot分析外泌体表面蛋白,可以很好的检测到TSG101,CD63和MHCC的存在。

核酸分析:通过Agilent 4200分析,可以检测到较为明显的外泌体小RNA条带,足以满足下游高通量测序的需求。

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货号

名称

规格

价格

外泌体分离

41202ES64

HieffTM Quick exosome isolation kit for Serum/Plasma

血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒

150 mL

2155.00

外泌体定量

20118ES60

Lysis Buffer for WB/IP Assays

免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

100 mL

228.00

20201ES76

BCA Protein Quantification Kit BCA

蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

500 T(100 mL)

288.00

外泌体鉴定

Western Blot

36230ES10

Precast Protein Improve Gels, 8%-20%, 10 wells

8%-20%高分辨率梯度预制胶,10

1盒(10块)

236.00

36231ES10

Precast Protein Improve Gels,,4%-20%, 10 wells

4%-20%高分辨率梯度预制胶,10

1盒(10块)

236.00

36232ES10

Precast Protein Improve Gels,, 8%,   10 wells           

8% 高分辨率梯度预制胶,10

1盒(10块)

236.00

36233ES10

Precast Protein Improve Gels,, 10%, 10 wells           

10%高分辨率梯度预制胶,10

1盒(10块)

236.00

36234ES10

Precast Protein Improve Gels,, 12%, 10 wells           

12%高分辨率梯度预制胶,10

1盒(10块)

236.00

36235ES10

Precast Protein Improve Gels,, 15%, 10 wells           

15%高分辨率梯度预制胶,10

1盒(10块)

236.00

20351ES76

GoldBand 3-color Regular Range Protein Marker10-180 kDa)三色预染蛋白质分子量标准

2×250 μL

585.00

20352ES76

GoldBand 3-color High Range Protein Marker10-245kDa

 三色预染蛋白质分子量标准

2×250 μL

615.00

外泌体标记

40726ES10

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针

10 mg

398.00

40757ES25

DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

25 mg

988.00

详情请咨询:400-820-8982