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产品名称: TMB One Solution (HRP-based ELISA) 单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用)
  • 产品货号:36602ES60
  • 产品规格:100ml
  • 产品价格:
  • 类别:ELISA
   
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    TMB One Solution (HRP-based ELISA)

    单组分TMB显色液(ELISAHRP显色用)

    36602ES60

    100ml

    4℃避光保存

    285.00

    产品描述

    TMB,即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine,中文全称3,3,5,5-四甲基联苯胺,是辣根过氧化物酶(HRP)的常用显色底物之一。在HRP的催化下,TMB被过氧化氢(H2O2)氧化生成蓝色产物。主要吸收峰在370nm652nm。在加入硫酸或者磷酸终止上述反应后,产物转变为黄色,最大吸收峰为450 m。传统的TMB显色试剂通常以AB液形式提供(TMBH2O2溶液分到两管,仅在使用前才可混合使用),并且容易产生沉淀,使用起来相对不方便,且容易导致操作误差。为克服以上缺点,我司采用最新的TMB显色技术,将所有相关试剂全部混合配成单一溶液。具有以下优点:

    1)即开即用,操作简单,使用前无需做AB液混合的准备;检测灵敏度不低于AB液体系;

    2)仅由单一溶液组成,简化了操作步骤,也降低了操作误差,结果更加稳定;

    3)含有独特的稳定剂,保证溶液4℃下长期保存;

    4)相比于其他HRP酶显色底物(如ABTSOPD)相比,检测灵敏度更高,而且本TMB溶液不含有DMFDMSO等有机溶剂,安全无毒;

    5)另外,TMB溶液可分为沉淀可溶型和沉淀不可溶型,前者适用于ELISA及其他通过液体反应检测HRP的应用,后者适用于WB或其他通过沉淀反应检测HRP的应用。

    本品为单一溶液形式且沉淀可溶型的TMB显色液,适用于ELISA检测,操作时只需加入200μl即用型的显色液,做简单孵育,加入2M H2SO4终止反应后,即可用分光光度计在450nm处测定吸光度。本品可供完成约500个样品的检测。另外,本品也可用于血液或血红蛋白等样品中过氧化物酶量的检测。

    运输和保存方法

    冰袋运输。4℃避光保存,一年有效。

    注意事项

    1)   TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。

    2)   正常情况,本显色液呈现无色或者淡蓝色(OD650nm0.04)。若是出现浑浊,或者颜色明显很蓝,应停止使用。

    3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法

    1)   使用之前,取出适量单组份TMB显色液,使其回到室温再开始使用;

    2)   对于ELISA检测:参考ELISA 检测试剂盒的实验步骤,当加入HRP标记的抗体并孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5min。洗涤完毕后,去除洗涤液,加入200μl TMB显色液。

    对于在96孔板内进行的其他适当检测(如检测组织或细胞样品内源性过氧化物水平):直接在96孔板内加入10-20μl 样品,之后加入200μl TMB显色液;

    3)   室温避光孵育3-30min或更长时间(可长达24h),直至显色至预期深浅(此时反应液为蓝色)。

    4)   加入50μl 2M H2SO4终止反应,溶液由蓝色转变为黄色,随后在450nm测定吸光度。或直接在370nm652nm测定吸光度

    常见问题

    1. 背景显色太深

    1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化的封闭液或者商业化的和一抗相同来源的血清(5-10%)进行封闭。另一方面,直接使用经过适当亲和吸附的二抗,以减小二抗的非特异性交叉吸附。

    2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。

    3)可考虑TMB底物本身反应过于强烈。为了避免沉淀的产生,可在终止反应后马上读数,或者进一步稀释一抗和/HRP结合物。

    2. 没有显色或显色太弱

    1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。

    2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。

    3)可以适当延长显色时间。

    4)如果上述改进不能获得预期效果,可以考虑更换效果更好的一抗或ELISA试剂盒。

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    TMB One Solution (HRP-based IHC/WB) 单组分TMB显色液(组化或者膜,HRP显色)

    36315ES60

    100ml

    69.00